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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 组织样品是当场匀浆后冷冻保存,还是直接将整个组织冷冻,等到分析时再匀浆它呢？
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all_

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zw0123456789zw at 2014-12-16 16:43:08
我觉得，你们这样的做法可能欠妥...

为什么？
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11楼2014-12-16 18:49:59
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Titanic416

银虫 (知名作家)

北京方便面真方便

【答案】应助回帖

★
zw0123456789zw: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-16 21:50:05
参考文献，应该是用液氮研磨均匀，淬灭以后提取代谢物，放置于-80度冰箱，尽快分析使用。

[ 发自小木虫客户端 ]
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阳光总在风雨后，请相信有彩虹！
12楼2014-12-16 19:11:30
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump
引用回帖:
11楼: Originally posted by all_ at 2014-12-16 18:49:59
为什么？...

匀浆是为了使样品被粉碎、细胞破裂，使RNA彻底释放出来。一般讲来，细胞无须粉碎即可直接匀浆，组织需要破碎后才能匀浆。
酵母菌和细菌需要先用相应的酶破壁后才能匀浆。
内源酶含量较低且较容易匀浆的组织可以在裂解液中通过匀浆器一次完成破碎和匀浆过程；植物组织，肝脏，胸腺，胰腺，脾脏，脑，脂肪，肌肉组织等样品，要么内源酶含量低，要么难匀浆，所以必须将组织的粉碎和匀浆分开操作。最可靠而且得率最高的粉碎方法是使用液氮的碾磨，最可靠的匀浆方法是使用电动匀浆器。
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13楼2014-12-16 21:49:52
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冰湖倩影 at 2014-12-14 19:17:30
怎么我们实验室是采用的方案1呢，我们课题组是做药物代谢的，测量组织里面的药物含量是用匀浆，都是先把组织取出来后，放置在-80度冰箱，分析的时候，融化加3倍体积生理盐水匀浆后在分析的。

如果做代谢组学研究，这么处理可能就不合适了
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14楼2014-12-16 21:52:22
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all_

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by zw0123456789zw at 2014-12-16 21:49:52
匀浆是为了使样品被粉碎、细胞破裂，使RNA彻底释放出来。一般讲来，细胞无须粉碎即可直接匀浆，组织需要破碎后才能匀浆。
酵母菌和细菌需要先用相应的酶破壁后才能匀浆。
内源酶含量较低且较容易匀浆的组织可以在 ...

谢谢，受教了。
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15楼2014-12-17 16:42:04
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cczl

银虫 (初入文坛)
我们实验室药动的，做的时候都是用第一种方法，没有剪碎，用的时候再剪
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16楼2015-01-06 19:15:39
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump
引用回帖:
16楼: Originally posted by cczl at 2015-01-06 19:15:39
我们实验室药动的，做的时候都是用第一种方法，没有剪碎，用的时候再剪

哦。剪碎要好些吧？
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17楼2015-01-06 20:30:34
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c108

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zw0123456789zw: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-01-26 21:35:40
我觉得还是第一种好，因为我在做组织匀浆时是用的玻璃匀浆器匀浆的，匀浆好后放置冰箱内再拿出来处理时发现回复室温时有很多组织团聚在一起了，液相检测时也发现有内源性干扰。
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18楼2015-01-26 20:06:26
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abing0747

铁虫 (正式写手)
2号方案比较合适，因为肝脏内有许多酶，虽然是低温保存，也不能保证所有的酶都没有活性。不过大多数人在实际操作过程中都是采用方案1，因为取出后直接匀浆的话人力上会增加。个人愚见。
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19楼2015-02-04 16:31:52
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呆呆娃0123

新虫 (正式写手)
请问，提取好的样品，如果仪器坏了，没法及时进样。应该如何保存呢？4度冰箱里放置，小分子代谢物，会有什么变化么？要哭了……没想到，还没开始进样，仪器就坏了，而且，坏了一周。。。
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20楼2017-07-26 09:44:46
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