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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 24孔板，细胞总是集中在中央
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littlepigpig

金虫 (小有名气)

[交流] 24孔板，细胞总是集中在中央

用24孔板种细胞，细胞总是集中在中央长。。。有什么好的解决办法呢？

我用的是MCF7细胞，用来做转染的，按照说明，100，000个细胞/孔，刚种下去时，已经尽量让细胞均匀分布，但是第二天，在孔的中央，细胞很密集，周围确很少，可能会影响到转染率
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1楼 2008-05-22 10:48:05
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shji03zhangjing

铜虫 (小有名气)
   我也是 实验遇到跟楼主同样的问题  愁的很呢
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2楼2008-05-22 11:13:42
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shji03zhangjing

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
littlepigpig(金币+3,VIP+0):谢谢帮忙
“细胞分布不均及解决办法：
培养种板之前，把培养板放入培养箱里进行几个小时的饱和后再取出，种入细胞时力量要轻，可采取用滴头在培养板孔的侧面慢慢加入让细胞悬液流入板孔中，培养的细胞基本是均匀生长。记住千万不要用振荡器振荡，否则细胞会聚积在一起。 ”      刚刚查到的    试试看
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3楼2008-05-22 11:28:38
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llh_2008

金虫 (正式写手)

振荡培养

★ ★
littlepigpig(金币+2,VIP+0):谢谢回答
放在摇床上，孵箱要有内接电源。人为也可以啊，不过就是辛苦
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做个好人！
4楼2008-05-22 11:29:52
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张力民

铜虫 (小有名气)
★ ★
littlepigpig(金币+2,VIP+0):谢谢回答
将细胞种完板子好，使劲用手指敲板子边上，每面都要敲，敲到手指发疼为止。
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5楼2008-05-22 13:17:58
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littlepigpig

金虫 (小有名气)
非常感谢上面各位的回答，迟点再评分
引用回帖:
Originally posted by 张力民 at 2008-5-22 13:17:
将细胞种完板子好，使劲用手指敲板子边上，每面都要敲，敲到手指发疼为止。

这个我也试过。。。但是没敲很久，敲10分钟吧，但是第二天还是聚在一起了。。。。
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6楼2008-05-22 15:12:10
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张力民

铜虫 (小有名气)
你是不是敲过头了啊
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7楼2008-05-22 16:14:28
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andyhu2001

银虫 (小有名气)
★ ★
littlepigpig(金币+1,VIP+0):谢谢。。。不好意思，只剩下3个币币了，一人一个
littlepigpig(金币+1,VIP+0):谢谢。。。不好意思，只剩下3个币币了，一人一个
我也遇到此问题，12孔板也这样，而96孔板却都集中在了边缘。
有个博士说左三圈、右三圈、垂直、水平摇动培养板，稍好一些
3楼的方法有效吗？
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但行好事，莫问前程！
8楼2008-05-26 22:18:15
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biorex

铜虫 (小有名气)
哈哈,我也碰见这样的问题,也总不能很好的解决,唯一的办法是细胞铺稀一些.其实这个问题的主要原因是我们用的细胞培养板质量差,不信你用进口的板看看.保证没这个问题了.个人意见
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9楼2008-05-27 19:14:53
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blackeyedliming

★
littlepigpig(金币+1,VIP+0):谢谢。。。不好意思，只剩下3个币币了，一人一个
试一下种细胞的时候先加培养液，再把细胞滴进去，不要旋转着混匀，水平、垂直两个方向交替混匀，另外做转染建议你用6孔板。
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10楼2008-05-28 09:46:21
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