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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 荧光定量
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量 已有3人参与

要做荧光定量，但现在测不了RNA的浓度，只有一个能测DNA和蛋白浓度的紫外分光光度计，请教各位我能不能先做反转录然后再测CDNA的浓度？当然会在反转录之前做消化基因组DNA
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即将加入研究生的大军，迷茫！
1楼 2014-12-10 15:10:18
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Renjingyu: 金币+3 2014-12-10 15:35:58
可以，但是先跑胶看看条带有没有问题先
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2楼2014-12-10 15:24:05
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Renjingyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-12-10 15:24:05
可以，但是先跑胶看看条带有没有问题先

嗯，跑胶的结果还可以
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即将加入研究生的大军，迷茫！
3楼2014-12-10 15:35:51
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Renjingyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-12-10 15:24:05
可以，但是先跑胶看看条带有没有问题先

如果跑胶18s很亮，28s降解严重，还能用吗
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即将加入研究生的大军，迷茫！
4楼2014-12-12 15:10:29
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linsui1989

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
好像反转录出来的cDNA长度不一，测的出浓度，但算不出拷贝数

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-12-12 16:29:53
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oO晶锅Oo

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Renjingyu: 金币+3 2014-12-15 09:50:04
能检测DNA吸光度就能检测RNA，因为它们都是在紫外光区260nm处有最大吸收，得到的OD值就可以初步定量。将RNA进行反转录得到cDNA后，Realtime PCR是一个看RNA表达差异的经典方法，建议做一下。
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6楼2014-12-13 14:03:39
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