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xjhsm

银虫 (小有名气)

[交流] 转基因植株的拷贝数验证

各位大侠们,我在上半年构建了植物表达载体,所用载体是plg-nl,待转基因烟草长大后,做了初步的pcr验证,9株烟草中8株为阳性苗,下面准备做southern杂交,可是实验室条件不允许,所以准备做一下酶切位点,来推测转基因植株是单拷贝还是多拷贝,但是反向pcr引物设计遇到困难,酶的选择不知如何下手,一定要选择平末端酶么?把烟草基因组打成多少段比较合适?还有没有其它验证拷贝数的实验?
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传统人士

新虫 (小有名气)

请问转基因烟草验证时有很多非特异性扩增怎么解决,有时候野生型总能扩增出与目的条带相同大小的产物,请问您是用什么引物进行转基因PCR的呢
2楼2018-10-16 08:44:10
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