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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 硫酸铵沉淀的蛋白为什么不溶解
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tj751

金虫 (小有名气)

[交流] 硫酸铵沉淀的蛋白为什么不溶解

请教:60%饱和度的硫酸铵沉淀真菌发酵液蛋白后,离心收集沉淀,沉淀用磷酸盐缓冲液溶解时为什么有许多沉淀都溶解不了呢?
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1楼 2008-05-21 08:10:43
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greenspringmi

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
lixiaoyi1981(金币+5,VIP+0):对不住，评帖晚了，没给你及时加金币。谢谢你的回答。
1、在发酵液里除了蛋白外还有一些杂质，用硫酸铵沉淀时，杂质也会沉淀下来；
2、一般，在收集到发酵液后，先高速离心一次，看看沉淀多不多，如果多的话，以后收集完发酵液后都要先离心；
3、沉淀溶解后，要离心除掉不溶物质；
4、你的目的蛋白是在发酵液里，那么肯定是可溶的，所以不溶的沉淀就不要理会了；另外处理样品时要保证低温操作，防止目的蛋白变性；
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2楼2008-05-21 08:31:27
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tj751

金虫 (小有名气)
谢谢楼上的回答,准备照着做试试看
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3楼2008-05-25 12:03:15
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
是不是你的缓冲液pH不合适呢？
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4楼2008-05-25 16:06:08
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fujinga

银虫 (小有名气)

我正在做硫酸铵沉淀，晕！

请教一下，是按照硫酸铵饱和度的常用表中的数据加吗？
从0%饱和度加到20%饱和度，没有出现沉淀，可是溶液的体积已经增大了，再加到30%饱和度时要量新体积并换算需加克数吗？先谢了。
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5楼2008-07-14 21:38:20
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