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落木778

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核基因转入人造血干细胞是否可行?已有1人参与

我是研究原核生物的,它的一基因拥有特殊抗性,我想把它转入造血干细胞中,不知可行?具体实验流程是什么,请大神略微讲解一下!!
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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落木778: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-12-09 10:38:05
可以试试的。你可以根据自己的目的,对造血干细胞稳定转染,或者利用重组酶。如果建转基因动物模型,常用Cre-loxP系统。http://www.biomart.cn/experiment ... dle\" border=\"0\">
慎思明辨博学笃行
2楼2014-12-09 05:46:50
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落木778

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-12-09 05:46:50
可以试试的。你可以根据自己的目的,对造血干细胞稳定转染,或者利用重组酶。如果建转基因动物模型,常用Cre-loxP系统。http://www.biomart.cn/experiment/430/502/503/504/28376.htm

打算培养造血干细胞,然后做稳定转染。因为是原核基因转入真核细胞中,很少有人做这方面的。请问有没有一篇这样的文献可以参考其方法与流程,
3楼2014-12-09 10:42:51
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 落木778 at 2014-12-09 10:42:51
打算培养造血干细胞,然后做稳定转染。因为是原核基因转入真核细胞中,很少有人做这方面的。请问有没有一篇这样的文献可以参考其方法与流程,...

因为要稳转真核细胞,你就按真核细胞转染处理就可以了,把cDNA连接到真核表达质粒上。方法与基因的来源无关。只是原核基因在真核表达后的蛋白质(产物是蛋白质吧?)修饰、运输、定位、折叠、降解等可能与原核不同。
慎思明辨博学笃行
4楼2014-12-09 10:52:15
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