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君子爱才

新虫 (小有名气)

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[求助] CYP11A1体外孵育实验求指导！！已有1人参与

最近被老板安排做一个CYP11A1对于药物代谢作用的课题。各种的不懂。。。。读了一些文献，遇到几个问题，请教各位大侠：
1、Liposomes (20μg, prepared from dilauroylglycerol-3-phosphatidylcholine (DLPC)) 这个 dilauroylglycerol-3-phosphatidylcholine 是什么东东
2、CYP11A1酶买来后，怎么样可以测一下纯度活性什么之类的。
3、文献上说加入0.1umCYP11A1，这个量怎么换算啊，好像不知道CYP11A1的摩尔质量。
4、反应终止后，代谢产物的分析是不是可以用LC-MS分析。
5、 At saturating concentrations, ketoconazole and posaconazole shifted kmax in the CYP11A1 absolute spectrum from 417 nm to 422 nm。这里是用什么仪器测的什么指标，看不懂！

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1楼 2014-11-29 12:58:03

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冰湖倩影

金虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
君子爱才: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-12-15 19:32:26

1.应该是脂质体的制备，不是药剂的不是特别清楚

主要回答下面的问题：

2. 买过来应该做个活性测试的，大公司出厂的时候都会测的(运输过程没问题的话，活性是应该是没问题的）用特异性底物的代谢来看酶的活性。
3. 购买的重组酶，购买的时候会发一张单子，上面是写有重组酶的浓度单位，我们购买的CYP酶浓度是1nM/ml。
4.文献里面说的应该是温孵体系中酶的最终浓度（不知道你的浓度咋这么高，重组酶老贵了，0.1uM 这得用多少呀），根据购买的酶的浓度来稀释，举个简单的例子，起始浓度1nM，最终浓度10pM, 200uL体系，就是加2uL的重组酶。
5. 最后这个不是特别清楚

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