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rescuz

金虫 (小有名气)

[交流] 单糖液相色谱结果分析,求解!!!神来救救我啊

LZ刚接触液相,主要是分析多糖里的单糖成分。但是这次先做单糖的液相色谱时,发现如此纠结的现象:葡萄糖与阿拉伯糖的峰图竟然基本一致。葡萄糖醛酸跑了2次结果完全不一样,但是lz记得自己肯定没有把单糖样品污染或弄混,求色谱大神解救!!!

单糖液相色谱结果分析,求解!!!神来救救我啊
葡萄糖.gif


单糖液相色谱结果分析,求解!!!神来救救我啊-1
阿拉伯糖.gif


单糖液相色谱结果分析,求解!!!神来救救我啊-2
葡萄糖醛酸1次.gif


单糖液相色谱结果分析,求解!!!神来救救我啊-3
葡萄糖醛酸2次.gif
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rescuz

金虫 (小有名气)

求回复啊
2楼2014-11-27 21:00:43
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
出的峰一样说明方法不合适。你用的是什么色谱柱?柱温多少?流动相是什么?梯度是什么?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
3楼2014-11-27 21:04:06
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rescuz

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by archbishop at 2014-11-27 21:04:06
出的峰一样说明方法不合适。你用的是什么色谱柱?柱温多少?流动相是什么?梯度是什么?

c18,实验条件没有设置柱温,流动相是溶剂A15%(V/V)乙腈+0.05 mol/L磷酸缓冲液(KH2PO4-NaOH,pH6.9),溶剂B,40%(V/V)乙腈+0.05 mol/L磷酸缓冲液(KH2PO4-NaOH,pH6.9),梯度模式:时间梯度为:0→10→30min,相应浓度梯度为:0→8%→20%溶液B
4楼2014-11-27 21:58:33
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
费姚永芬: 金币+2, 辛苦了 2014-11-28 08:29:28
引用回帖:
4楼: Originally posted by rescuz at 2014-11-27 21:58:33
c18,实验条件没有设置柱温,流动相是溶剂A15%(V/V)乙腈+0.05 mol/L磷酸缓冲液(KH2PO4-NaOH,pH6.9),溶剂B,40%(V/V)乙腈+0.05 mol/L磷酸缓冲液(KH2PO4-NaOH,pH6.9),梯度模式:时间梯度为:0→10→30 ...

根据我的经验,糖类用C18柱难以得到理想的结果。推荐你使用HILIC柱,比如氨基柱。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
5楼2014-11-27 22:08:26
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violettang

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
waters有一款HILIC柱,amide系列,我觉得分离糖类相当给力。或者是奥泰的糖柱,现在是GRACE的牌子,分离糖类柱效很高,也很耐用,比氨基柱好很多呢!
6楼2014-11-28 10:45:12
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mxy216

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
更换一下色谱柱,糖类柱子,楼上说的那样,另外你考虑一下是否是上几针的残留,保留时间比较长,40min内未能洗脱出来。
7楼2014-11-28 10:46:59
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8楼2014-11-28 11:04:24
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fujinguo06

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
糖类分析选用氨基柱,用过GRACE的carbohydrate es,基线很稳,流动相用乙腈和水就可以了。保留时间一样有可能是正常的,找找氨基柱吧。
9楼2014-12-01 17:34:58
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