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zyk_527

银虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE电泳,真能准确显示蛋白分子量吗?

最近在公司里做了一个项目,目的蛋白的理论分子量是7KD,可跑出来后居然有14KD左右,以前也有过类似3-5KD的偏差,可这次偏的比较大.用的是还原胶,应该不是二聚体吧,苦恼,SDS-PAGE电泳,真能准确显示蛋白分子量吗?
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1楼 2008-05-16 15:22:45
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
★
lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):呵呵，谢谢。
从理论上讲，SDS-PAGE基本可以准确显示蛋白分子量，因为分子量大小是和结合的SDS成正比的，但是存在样品处理问题，如果样品变性不彻底，二级键没有完全打开，结合的SDS偏少，分子量就会偏低啊，具体可以看一些相关的书籍
希望你的问题早日得到解决
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2楼2008-05-16 22:14:08
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greenspringmi

银虫 (正式写手)
★ ★
lixiaoyi1981(金币+2,VIP+0):有道理，鼓励一下
SDS-PAGE不能够完全反应蛋白的分子量，只是一种快速而且简便的检测蛋白分子量的方法；
可以跑一个非变性胶来看看，结合变性胶，可以知道该蛋白是不是多聚体（一般，在非变性胶上显示的分子量和在变性胶上显示的分子量的比例即是蛋白单体的组合的数目）
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3楼2008-05-17 09:03:18
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