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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助--紫外数据反常
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 xiaoyingzi0810 的 2 个金币

xiaoyingzi0810

新虫 (正式写手)

[交流] 求助--紫外数据反常

从植物里回流提取东西，溶剂萃取后（可能含有相当一部分杂质）在325nm下用紫外测含量（目前只有这个条件，呵呵）.可是刚提了10min，含量就已经很高了，随着提取时间的增加，紫外测得的含量却一直降低，4h后不再变化。
   我们是先用石油醚脱脂后再用乙醇提的，时间短时提取液有些乳黄色，随着提取时间延长，反而澄清了。
   按说10min应该提不出来多少东西，并且要提的东西再试验条件下很稳定，应该随着时间延长含量增加啊！百思不得其解中，还望哪位大侠能够帮忙解惑，不胜感激！
[search]提取[/search]

[ Last edited by xiaoyingzi0810 on 2008-5-17 at 16:13 ]
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幸福就像小狮子的尾巴，它越是追越是追不到。但是当小狮子往前走的时候，幸福又会紧紧跟着它。
1楼 2008-05-16 10:45:25
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dongfly95tt

★
xiaoyingzi0810(金币+1,VIP+0):已经用标准品试过了，所提有效成分在本实验条件下很稳定，呵呵，希望能继续帮忙分析。
你提是有效部位，可能生成其他物质，生成的其他物质可能仍是有效成分，但最大紫外吸收波长改变了，
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2楼2008-05-16 16:45:16
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cpu0343126

银虫 (小有名气)
★ ★
xy4585618(金币+0,VIP+0):谢谢应助
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
xiaoyingzi0810(金币+1,VIP+0):我们是把提取液稀释后再测的紫外，吸光度在0.3~0.6间测的。希望能继续帮忙解决这个问题，呵呵。
目测 不同时间提取物的颜色 ,如果颜色变深很明显,那很可能是你的紫外有问题,如果颜色变化不大,估计是你起始的吸光度高 再变已经超出机器范围了.适当减少药材量看看
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3楼2008-05-16 19:17:20
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cpu0343126

银虫 (小有名气)
★ ★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):辛苦了，好同志一个，你的建议希望可以帮助这位朋友
xiaoyingzi0810(金币+1,VIP+0):谢谢。随着提取时间的变长，黄色加深，同时变得澄清了。
又仔细看了一下楼主的问题,"时间短时提取液有些乳黄色，随着提取时间延长，反而澄清了"这个就很肯定了,有黄色的时候他的 A值 基本上可以肯定是高于澄清的时候. 你把最后的澄清的那个液体扫一个全波长看看最大吸收在哪里.另外你那个黄色是随着提取时间变长而变淡的还是随着样品放置时间变长而变淡的?
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4楼2008-05-18 15:29:26
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jenior

金虫 (小有名气)
★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):谢谢参与
澄清后的颜色是变淡了还是变深了？
还有，你这种问题也可能是开始杂质引起体系一定程度的乳化（乳黄色），随着时间的延长，有效物与杂质分开的越完全（澄清）。特别支持楼上清液全程扫描的做法。
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5楼2008-05-18 21:38:13
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cpu0343126

银虫 (小有名气)
★
clkk216(金币+1,VIP+0):感谢你参与战友的讨论。非常感谢~！
先把澄清的做扫描确定最大吸收,估计你前面的东西有不溶的,你把前面做的东西12000RPM离心3分钟以后取上清测.
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6楼2008-05-18 23:37:49
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dxyzoe

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流！
你为什么说10min提取不出多少东西？如果是你回流好的样品浓缩物，加有机溶剂应该很快就出来的呀，
还有，紫外没什么选择性，你说的很有可能不是你要的物质在325nm形成的吸收，建议用hplc测定。
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7楼2008-05-25 09:18:28
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