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法国梧桐88

铜虫 (小有名气)

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[求助] 根癌土壤杆菌 Agrobacterium tumefaciens (Smith and Townsend) Conn 培养方法已有1人参与

有哪位高人有根癌土壤杆菌的培养方法？从菌种库买到了这种菌，想做个生长曲线，但查了文献也没有找到！！

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1楼 2014-11-25 09:36:50

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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 法国梧桐88 at 2014-11-26 09:54:36
有相应的培养基，但是我不知道大概的培养时间。做生长曲线是想在做实验的时候都能取到对数期的菌，所以通过生长曲线可以知道大概需要多长时间可以达到对数期，但是对培养条件不是很清楚，如摇床转速，活化培养时间 ...

没有特别需要注意的，摇床转速150rpm左右吧，购买的菌接活了以后在相应培养基里转接3代，初步观察下生长状况，比如是不是晚上接菌第二天就能长起来，如果可以的话，做生长曲线之前活化12h左右，OD不能太大，1.0左右，就可以接大瓶，接种量不超过1%（我们做的根癌农杆菌是按照0.2%接种子液的，对数期大概在16-24h，仅供参考），然后每隔4h取样测OD（这个间隔时间也可以根据自己情况略作调整）