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法国梧桐88

铜虫 (小有名气)

[求助] 根癌土壤杆菌 Agrobacterium tumefaciens (Smith and Townsend) Conn 培养方法 已有1人参与

有哪位高人有根癌土壤杆菌的培养方法?   从菌种库买到了这种菌,想做个生长曲线,但查了文献也没有找到!!
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 法国梧桐88 at 2014-11-26 09:54:36
有相应的培养基,但是我不知道大概的培养时间。做生长曲线是想在做实验的时候都能取到对数期的菌,所以通过生长曲线可以知道大概需要多长时间可以达到对数期,但是对培养条件不是很清楚,如摇床转速,活化培养时间 ...

没有特别需要注意的,摇床转速150rpm左右吧,购买的菌接活了以后在相应培养基里转接3代,初步观察下生长状况,比如是不是晚上接菌第二天就能长起来,如果可以的话,做生长曲线之前活化12h左右,OD不能太大,1.0左右,就可以接大瓶,接种量不超过1%(我们做的根癌农杆菌是按照0.2%接种子液的,对数期大概在16-24h,仅供参考),然后每隔4h取样测OD(这个 间隔时间也可以根据自己情况略作调整)
4楼2014-11-26 10:06:49
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心交流! 2014-11-26 14:27:18
菌种库应该会提供相应的培养基啊,不知道你做生长曲线的目的是什么,只要能长起来不就可以了吗
2楼2014-11-25 18:33:53
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法国梧桐88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mirror3895 at 2014-11-25 18:33:53
菌种库应该会提供相应的培养基啊,不知道你做生长曲线的目的是什么,只要能长起来不就可以了吗

有相应的培养基,但是我不知道大概的培养时间。做生长曲线是想在做实验的时候都能取到对数期的菌,所以通过生长曲线可以知道大概需要多长时间可以达到对数期,但是对培养条件不是很清楚,如摇床转速,活化培养时间等等。请问您知道吗?谢谢!
3楼2014-11-26 09:54:36
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