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UTKProgress

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
bxzc123: 金币+20, 翻译EPI+1, ★★★很有帮助 2014-11-25 22:11:57

一种来自海洋细菌Alcanivorax的新型的glyA基因被克隆，并在大肠杆菌BL21（DE3）上表达。重组的glyA 编码了一个由418个氨基酸组成的多肽，被命名为 AdSHMT，它显示出与来自Shewanella藻的SHMT最高70％的相似。在SDS-PAGE分析中纯化的酶为45 kDa的单链 (多肽)。结果发现，在50◦C和pH7.0时，AdSHMT表现出最大的活性。AdSHMT against dl-threo-3-phenylserine (这里的一个专业知识点，我不懂。应该是一生化反应)的 Km, Vmax, 和 Kcat 数值分别为0097摩尔/升，3255摩尔/分钟/毫克和2451/秒。更重要的是反相高效液相色谱法检测表明，在35 ◦ C时（AdSHMT）催化glycine为l-serine反应中当glycine的初始浓度为0.399 M时在第22小时AdSHMT取得了88.37%的转化率。从Alcanivorax SP到AdSHMT的分子转化率是目前在工业生产中应用的从E. coli到EcSHMT的转化率的1.26倍。因此，AdSHMT因其高的酶转化率可能在工业上得到应用。

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2楼2014-11-25 10:06:15

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