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carla1

[交流] 求助-转化农杆菌

我最近构建成功了一个载体,pcr及酶切检测都没问题,但是转化LBA4404农杆菌的时候,死活转不进去,望高手指点迷津,感激不尽!
[search]转化农杆菌[/search]
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月月大可

木虫 (著名写手)

我也在往LBA4404中转,质粒以前早有人构建好了。
我转化的方法和转化大肠杆菌的方法相同(分子克隆上的热激法),只是培养温度是28度,温育时间延长到两小时。用卡那筛选。
很让我不解的是没有 转化的感受态细胞(对照)在培养两天后也长出来了。在有卡那的平板中挑取了十几个转化子摇菌提质粒没有发现我的目的质粒。不知道原因何在
2楼2008-05-18 15:45:52
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jerome711

银虫 (小有名气)

测序没?
做懂得生活的人
3楼2008-05-20 10:09:16
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