pET 28α在DH5α中摇菌18个小时，菌浓度低，质粒得量低是怎么个情况啊？ - 分子生物 - 核酸提取

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BCK920314

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7楼: Originally posted by happydove at 2014-11-20 13:40:34
摇菌时不用封口膜吧封得很紧也不利于菌的生长
另外大提质粒可以得到更多

不能大提，只能用小提试剂盒。。。摇菌的时候用的是JET的50ml离心管，管盖拧的不是非常紧，再用封口膜封的。

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11楼2014-11-20 18:23:29

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BCK920314

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4楼: Originally posted by winterb at 2014-11-20 08:45:41
倒平板时,加入抗生素培养基的温度过高.倒平板时温度大概在45度.这是丢质粒的原因.

我现在不仅仅是质粒少，菌也少，现在要提高菌的含量，也要提高质粒得量。

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12楼2014-11-20 18:25:39

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myheat

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9楼: Originally posted by BCK920314 at 2014-11-20 18:20:11
是摇菌的培养基体积么？我要做测试，看2ml菌能提到多少，不能超过2ml

...

那就用更营养的培养基

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13楼2014-11-20 20:10:59

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xiaoshidemei

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2楼: Originally posted by 喜气洋洋 at 2014-11-19 23:06:59
跟lz一样，最近也在用pet-28，第一次提取质粒浓度只有31.8ug，后来摇了四管，试剂盒提取最后一步收集时，将收集好的质粒重新吸到另一柱子中，再离心，富集四管的量就够了。
...

质粒拷贝数低，这是正常现象。

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14楼2014-11-21 07:56:48

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