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汕头大学海洋科学接受调剂
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BCK920314

新虫 (初入文坛)

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7楼: Originally posted by happydove at 2014-11-20 13:40:34
摇菌时不用封口膜吧  封得很紧 也不利于菌的生长
另外大提质粒可以得到更多

不能大提,只能用小提试剂盒。。。摇菌的时候用的是JET的50ml离心管,管盖拧的不是非常紧,再用封口膜封的。
11楼2014-11-20 18:23:29
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BCK920314

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by winterb at 2014-11-20 08:45:41
倒平板时,加入抗生素培养基的温度过高.倒平板时温度大概在45度.这是丢质粒的原因.

我现在不仅仅是质粒少,菌也少,现在要提高菌的含量,也要提高质粒得量。
12楼2014-11-20 18:25:39
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myheat

铜虫 (小有名气)


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9楼: Originally posted by BCK920314 at 2014-11-20 18:20:11
是摇菌的培养基体积么?我要做测试,看2ml菌能提到多少,不能超过2ml...

那就用更营养的培养基

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2014-11-20 20:10:59
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xiaoshidemei

新虫 (正式写手)


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2楼: Originally posted by 喜气洋洋 at 2014-11-19 23:06:59
跟lz一样,最近也在用pet-28,第一次提取质粒浓度只有31.8ug,后来摇了四管,试剂盒提取最后一步收集时,将收集好的质粒重新吸到另一柱子中,再离心,富集四管的量就够了。
...

质粒拷贝数低,这是正常现象。
14楼2014-11-21 07:56:48
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Neo2000

木虫 (著名写手)


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你的质粒不大对,偏小,28a是5k多的质粒,再怎么跑也不会到两千多的地方

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2014-11-21 08:47:07
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smdsfy

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
pet-28a拷贝数不高,要准备质粒的话,最好大抽,摇1L 培养基提质粒
16楼2014-11-21 09:24:24
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咆粑

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-21 08:47:07
你的质粒不大对,偏小,28a是5k多的质粒,再怎么跑也不会到两千多的地方

超螺旋的质粒跑电泳比实际大小要小些。
17楼2014-11-21 10:31:32
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Neo2000

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by 咆粑 at 2014-11-21 10:31:32
超螺旋的质粒跑电泳比实际大小要小些。...

我知道会小一点,但不可能小那么多

[ 发自小木虫客户端 ]
18楼2014-11-21 12:15:04
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
手工提的,比试剂盒提的要多很多的样子。
19楼2014-11-21 12:35:31
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BCK920314

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-21 08:47:07
你的质粒不大对,偏小,28a是5k多的质粒,再怎么跑也不会到两千多的地方

我没有酶切过,而且是超螺旋状态,位置是没错的
20楼2014-11-21 19:26:49
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