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皮皮在此

新虫 (初入文坛)

[求助] dsRNA合成出现两条带,急求赐教!

我最近在合成dsRNA,以后想用来做干扰。我用的是Ambion的MEGAscript® RNAi Kit。我在sense引物和antisence引物的5‘端都加了T7启动子,然后做PCR,产物纯化后得到一条特异条带,然后根据试剂盒说明书合成dsRNA,我的dsRNA大小约520 bp。合成的dsRNA结果应该是一条特异的条带,可是我得到的是两条特异条带,现在我不知道为什么会出现一条比我的dsRNA稍小的条带,也不明白这条带是什么。图1中右侧是我加入的DNA模板,即PCR产物纯化的结果,左侧是我得到的dsRNA,A条带是我的目的条带,B条带我不知道是什么。有谁做过此类的实验,能不能帮忙分析一下!

dsRNA合成出现两条带,急求赐教!
图1.jpg
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