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ahui1990

新虫 (初入文坛)

[交流] 腺苷液相色谱图不对称 标样和测试样品都不对称 可能的原因都会是什么呢 已有2人参与

机器是Agilent 1100
柱温:30度,流速1 mL/min,流动相:甲醇:磷酸二氢钾=1:9,pH=6.0

26 ug/mL 腺苷标准品:
腺苷液相色谱图不对称 标样和测试样品都不对称 可能的原因都会是什么呢

之后是标准样和测试样品的叠加:
腺苷液相色谱图不对称 标样和测试样品都不对称 可能的原因都会是什么呢-1

中间那个是标准品,上下两个都是测试样品,不过测试样品分别是一磷酸腺苷和三磷酸腺苷,也就是看看它们水解之后形成的腺苷含量。我感觉既然这3个样品的峰型完全一致,应该问题是出在测试过程中或者之前的准备工作中。

我是第一次做液相色谱,对这个不怎么了解,所以想请教一下可能出现峰型不对称的原因,我自己在逐个分析一下,谢谢~
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议楼主换根色谱柱试试,从峰形看是柱子坏了,对照品应该是一个峰(对照品含两个物质的除外),该峰(3个都一样)都是包含了一个肩峰,应该是柱头塌陷的原因
归零
3楼2014-11-15 08:34:39
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以尝试梯度洗脱。还有,你用的什么柱子?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2014-11-14 16:32:52
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ahui1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2014-11-14 16:32:52
可以尝试梯度洗脱。还有,你用的什么柱子?

用的C18的柱子

梯度洗脱是个好方法,我也曾怀疑是不是流动相的问题,谢谢~
4楼2014-11-24 13:47:15
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ahui1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by klicking at 2014-11-15 08:34:39
建议楼主换根色谱柱试试,从峰形看是柱子坏了,对照品应该是一个峰(对照品含两个物质的除外),该峰(3个都一样)都是包含了一个肩峰,应该是柱头塌陷的原因

不大可能是柱子坏了,我用的学校公用的色谱仪,之前没听说过有这种情况,也总不可能坏在我这里……
5楼2014-11-24 13:50:16
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