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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 细胞可能被支原体污染了
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pinger06

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有一家生物公司卖抗支原体试剂，三天就能达到杀灭效果，对细胞培养不影响，你可以试试看

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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11楼2015-08-16 07:51:18
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paning

铜虫 (正式写手)
重新复苏就行。
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12楼2015-08-17 10:25:20
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专属cc

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这些漂浮物是什么？感觉细胞都要破碎了。。。如果楼主传了几代，还是这样，建议重新复苏！如果还是不行，那就是感染了，要重新清洁细胞房。
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13楼2015-08-17 10:43:27
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专属cc

金虫 (小有名气)
不过楼主为何感觉是支原体感染？？？？
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14楼2015-08-17 10:44:04
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nerojune

金虫 (正式写手)
不懂。帮顶
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15楼2015-08-25 16:21:32
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janhwa74

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
支原体污染是基础研究和工业生产中一个很常见的问题，可能有高达87%的细胞系发生过支原体污染。。支原体是一种直径约为0.2~0.3um，无细胞壁的原核生物，可透过常见过滤膜（0.22-0.45 um），常规的无菌过滤方法不能将其去除，细胞培养常用的青霉素和链霉素也不能清除培养物中的支原体。支原体污染能耗尽营养物，促进代谢积累，导致pH改变，诱导或抑制细胞因子表达，并改变培养细胞的代谢、增殖特征及形态。支原体细胞体积小，种类繁多，培养物的混浊度以及对加富培养基的需求有限，此外，某些种类或菌株可能是细胞侵入性的，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。由于支原体污染能影响几乎每一个细胞参数，所以很多研究都强调常规筛选研究细胞系的需要，以确保观察到的结果不被污染所损害。基于上述原因，开发一种针对支原体的快速可靠的检测方法颇具必要性。
我公司开发的支原体PCR检测试剂盒简化了测试过程，提高了检测效率，能在2-3小时内获得可靠的结果，是一种灵敏度高、特异性强、快速的检测细胞培养中支原体污染的方法。
本试剂盒特点：①特异性引物是针对高度保守的支原体16SrRNA序列设计的，可以用于检测非常广泛的支原体种类，不会受真核细胞或细菌DNA干扰。经本试剂盒测试的支原体菌株包括：猪鼻支原体（M.hyorhinis）、口腔支原体（M. orale）、肺炎支原体（M. pnemoniae）、精氨酸支原体（M.arginini）、发酵支原体（M. fermentans）、唾液支原体（M. salivarium）、无胆甾支原体（A.laidlawii），涵盖了所有常见的支原体污染种类；②采用降落PCR（Touchdown PCR）法扩增DNA片段，只需进行一次PCR反应，同时又比普通PCR灵敏度更高；③采用的阳性对照样品可扩增产生大小为643bp的DNA片段，使用的引物与支原体检测相同，用于判断PCR反应条件是否适合，从而鉴别假阴性结果；④本试剂盒包括了除模板外PCR反应所需的所有成分：DNA聚合酶，dNTPs，PCR反应缓冲液，引物和阳性对照样品，您只需要添加模板和水就可以进行PCR反应。
http://www.biomart.cn/infosupply/31432225.htm
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16楼2016-01-02 20:10:36
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janhwa74

银虫 (小有名气)
支原体清除剂

本产品属于新一代杀菌抗生素，可用于细胞培养中支原体污染的预防和清除。同时能以较低的浓度发挥广谱的抗革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的作用，譬如能作用于耐青霉素与链霉素的细菌，已证实其对真核细胞无毒性。
本产品包括两种杀菌成份，即大环内脂类和喹诺酮类物质。大环内酯能结合细菌50S核糖体亚基，从而抑制蛋白质合成，喹诺酮则抑制细菌DNA消旋酶的活性。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制细菌生长，明显增强除菌效果。这两个靶点在真核细胞内都不存在，所以本产品对真核细胞无毒。将本产品作用浓度加高5倍，对细胞没有明显的影响。在更高的浓度下，细胞的生长速率会出现下降，这是由于线粒体呼吸受到抑制的缘故，去除本产品后细胞生长速度即可恢复正常。
由于优越的双重除菌机制，本产品可避免抗性支原体的产生。
喹诺酮可以自由的穿透哺乳动物细胞，可以同时除去游离形式的及真核细胞内部的支原体，这个特点保证了经过处理的细胞不会被支原体感染细胞中释放出的支原体反复感染。因此可以避免除菌后细胞内支原体的反复感染。
http://www.biomart.cn/infosupply/31432226.htm
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17楼2016-01-02 20:11:34
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浅巷子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
，建议楼主先进行支原体的pcr检测，如果真的是抗支原体污染再购买清除试剂吧，建议够买汉恒生物的抗支原体试剂，申请过他们家的免费试用装，效果不错，可以尝试。

给你个链接吧，请叫我雷锋http://www.hanbio.net/cn/services/item/614
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18楼2016-03-09 21:38:57
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