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关于UPLC BEH Amide 柱子的问题 已有3人参与
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| 我是做中药的,之前用T3 柱在UPLC 上做液相,峰都集中在30%的乙腈之前,客服人员跟我说让我换Amide的正相柱,可是效果也不好呀。有用过Amide柱子的高手吗?还有一个问题,正相柱的梯度应该怎么设置呢?是和反相柱相反吗? |
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2楼2014-11-07 14:58:07
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
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我最近也在用这款柱子,如楼上所说,如果你要采用hilic,水相为强洗脱溶剂,一开始可以设置为高有机相,低水相的比例,逐渐转化为低有机相,高水相的比例(有机相不得低于50%,否则有可能转化为反相模式)。如果用盐,一般是甲酸铵,乙酸铵等在有机相中溶解性比较好的盐,防止析出。由于你用的是UPLC,所以溶剂效应会很明显,溶剂的选择一定要接近你的流动相初始比例(即不能是强洗脱溶剂),否则很容易使你的峰形差,分离度差。在hilic模式下,溶剂是很难解决的问题。如果分离度差,可以提高柱温,这款柱子很耐用,我的使用温度达到55度。waters公司有一本关于hilic的小册子,你可以找一本参考一下,很实用。 T3柱是C18柱吧,你用它在30%乙腈出峰,那么你用Amide反相模式应该也可以吧,多改改条件,这个柱子很耐用。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
3楼2014-11-07 15:29:32
4楼2018-03-22 20:23:59












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