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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zhangxl1992

木虫 (正式写手)

[交流] 关于荧光探针在细胞内检测!

请问我要测荧光探针在细胞内的应用,24well板,细胞已培养好.

  想知道有什么需要注意的吗?
如:探针加入的浓度对细胞有什么影响?10uM可以吗?
    是否浓度越稀培养的时间需要越长?时间通常为多少?
我用了半个小时,荧光有些弱,是否探针还未进去多少?

另外:加入离子后,细胞内应有荧光,但却没有了.是否是激光照的原因.
      用激光照过的细胞还能继续用来加离子培养吗?
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zhangxl1992

木虫 (正式写手)

还有个问题,如果不用0.8厚的特殊板是不是就不能做共聚焦了.
如果用载玻片的话,应该如何具体操作呢.不好意思,我是外行没有做过.现在普通荧光显微镜做完了,要做共聚焦发现不能用原来的24well板了,请大家帮帮!
如果用载玻片,如何用PBS洗呢?
先谢谢各位!
9楼2008-05-14 17:56:49
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jennifertina

★ ★
zhangxl1992(金币+2,VIP+0):谢谢你迅速的回答!
用的什么荧光啊?我用过FITC的,被激光照的太久,会粹灭.最好能用抗粹灭剂配合使用.
2楼2008-05-08 15:57:50
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zhangxl1992

木虫 (正式写手)

什么样的抗猝灭剂呢,配在培养基里,还是缓冲的FBS里呢?
3楼2008-05-09 01:18:09
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十比

木虫 (著名写手)

★ ★
zhangxl1992(金币+2,VIP+0):谢谢
24孔板那么厚能用激光共聚焦看吗?
你需要说明你具体的染料,至少要知道激发波长和接收波长。另外抗淬灭剂只能用在固定之后也就是说死细胞上吧?如果你要活体观察恐怕不能用,只能减少你的荧光照射时间和强度
4楼2008-05-09 13:16:31
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