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囧囧侠灬

木虫 (小有名气)

[求助] HPLC中出峰面积问题 已有7人参与

最近才做HPLC,有个问题啊。
我标样不同浓度去测,结果现在出峰的位置都基本是一样的,但是面积也几乎一样,这个怎么回事啊?
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默默耕耘期待花开一季
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525691817

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
14楼: Originally posted by 潘晔007 at 2014-10-24 17:13:27
这就对了,你的流动相使用的甲醇吧?检测到的大峰应该是溶剂峰……甲醇的末端吸收在200nm左右,乙腈的在190nm左右,你可以试试乙腈做流动相,看看情况怎么样……或着加大进样量试试……...

同意此楼。溶剂峰一般在210nm一下,所以如果你的目标物在210nm以上有吸收的话,建议选择210nm以上的波长,即使吸收比较弱,但是干扰会减少。如果确实要选择210以下的话,建议最好使用色谱纯流动相,以减少低波长的紫外吸收干扰;另外加大进样浓度,防止目标峰被溶剂峰掩盖。
17楼2014-10-25 09:44:14
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议楼主给出更详细的信息,出峰时间多少?峰面积多少?上图更好。简单推测,可能主峰没有出来,检测到的只是溶剂峰。
归零
2楼2014-10-24 11:28:47
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前碰到过别人的一个类似的问题,后来发现不是目标峰,目标峰当时的条件未洗脱。
3楼2014-10-24 11:31:18
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
正常情况下如果是同一种物质就应该出峰时间一样,如果像你说的峰面积也一样那可能是溶剂峰,待测成分并没有出峰。

为了部落!
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2014-10-24 11:44:27
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