3楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-23 11:57:57
我们这里都是用牙签调菌直接接到PCR体系中，如果正确的话肯定可以P得出来的···我最近也在连19T载体，也遇到相同的情况，用PCR扩增的时候没有条带，但酶切可以切出来，也搞不清楚是怎么回事···

7楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-10-23 15:16:26
给楼主个建议；

将菌落先挑到PCR管中 加部分水，然后用PCR仪95℃加热15分钟，帮助DNA裂解，

虽然程序中含有这一步，但是时间相对较短，裂解的模板更有助于扩增。。。加油

11楼: Originally posted by 我就是保哥哥 at 2014-10-27 17:18:18
我最近也是这种情况，PCR出不来，但酶切的话所有的质粒都可以切下带，你可以用没有酶切的质粒和酶切后的质粒一起跑胶，看看你的质粒切开没有；我的情况是是，我酶切后跑胶的质粒也是切下条带来了（和我准备连接 的 ...