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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮兰R-250 测定蛋白含量遇到的问题
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雨辰853

铜虫 (小有名气)
原来如彼！！
R250中的R代表Red，偏红，R250属于慢染，脱色脱的完全，主要用于电泳染色
R250(Coomassie brilliant blue R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824,
λmax=560―590nm.染色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色.但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点.

G250中的G就是Green，偏绿，G250属于快染，脱色脱的不彻底，主要用于蛋白测定
又名Xylene brilliant cyaninG.比考马斯亮蓝R250多二个甲基.MW=854;λmax=590―610nm.染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析.
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11楼2008-07-14 20:16:07
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杨兴深

铜虫 (小有名气)
我也是用考马斯亮蓝Ｇ２５０测的可溶性蛋白含量，可测定时ＯＤ值不稳定，不晓得是咋回事，标准曲线都没做出来，很是郁闷
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12楼2008-08-23 13:04:52
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xiaoyao1xi

木虫 (小有名气)
蛋白浓度使用考马斯亮兰G-250，而不是R-250，你用错试剂了
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13楼2008-08-30 08:14:01
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Ducount.Y

金虫 (小有名气)
对R250是用于蛋白质染色，不适合定量分析
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14楼2008-08-30 15:49:13
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lxzok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zmy535 at 2008-5-4 19:24:
用Braford 工作液，既没有加蛋白的空白。即使是正值，也很小？
我测定时用的石英比色皿，有影响吗？书上建议用塑料的。

[ Last edited by zmy535 on 2008-5-4 at 19:33 ]

没错，你该买G-250
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15楼2008-08-30 15:53:05
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lengshan1977

应该用G-250
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16楼2008-08-30 19:28:00
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fujinga

银虫 (小有名气)

试剂错了

我刚开始做的时候，明明试剂瓶上写得G250，可配出来就是蓝紫色，实验室的人都说这也太漂亮了了，弄了好久才知道真的是试剂错了，气得我再不要那家的试剂了
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17楼2008-09-06 05:29:51
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wjm0403

金虫 (小有名气)
考马斯亮兰R-250是一种染色剂,用于蛋白电泳的染色,用于鉴定蛋白纯度;而G-250则是用于测定蛋白含量
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18楼2008-09-16 12:58:26
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angelo607

铁虫 (初入文坛)
我染色用的R250配出来是深蓝色的，
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集众虫之力，蛀科研桎梏
19楼2008-09-16 20:36:05
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