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考马斯亮兰R-250 测定蛋白含量遇到的问题
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考马斯亮兰R-250 测定蛋白含量遇到的问题： 按照要求配制的溶液是蓝色的，而不是书上所说的红棕色？ 测定标准曲线时吸收峰为负值？ 哪位高手给指点一下？ |
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原来如彼！！ R250中的R代表Red，偏红，R250属于慢染，脱色脱的完全，主要用于电泳染色 R250(Coomassie brilliant blue R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824, λmax=560―590nm.染色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色.但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点. G250中的G就是Green，偏绿，G250属于快染，脱色脱的不彻底，主要用于蛋白测定 又名Xylene brilliant cyaninG.比考马斯亮蓝R250多二个甲基.MW=854;λmax=590―610nm.染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析. |
11楼2008-07-14 20:16:07
2楼2008-05-04 17:42:32
3楼2008-05-04 19:24:52
puma2003
铁杆木虫 (著名写手)
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4楼2008-05-04 21:51:42