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[求助]
急求：自制的sephrose-4B亲和层析柱纯化抗体无法洗脱下来！！！
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| 新手发帖期望，得到牛人帮助：最近使用溴化氰活化的sephrose-4B柱材制作亲和柱，检测自己的蛋白已经偶联到柱子上，偶联率有90%左右，但现在有个问题一直在困扰我，我将样品（兔血清）上样后，在特异性洗脱收集液中没有检测目的抗体（应该是抗体吸附后未能洗脱下），所以想向有经验的大牛请教：1 血清上样后怎样检测目的蛋白是否被吸附 2选择怎样的洗脱液可以将目的蛋白洗脱下来（希望能给我提供些洗脱液种类）3怎样检测目的蛋白洗脱彻底。问题有些多，期待您的回复，谢谢。 |
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