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郭东生

金虫 (小有名气)

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liaifen1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
郭东生: 金币+150, ★★★★★最佳答案, 谢谢! 2014-10-22 09:52:27
豆哥: 金币-120, 有马甲嫌疑,暂时扣除金币,请当事人三日之内说明问题。 2014-10-22 10:33:44
聚合酶链反应(英文全称:Polymerase Chain Reaction),简称PCR。聚合酶链反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。标准的PCR过程分为三步(如图所示):
1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,
氢键断裂,形成单链DNA
2.退火(复性)(40℃-65℃):系统温度降低,引物与
DNA模板结合,形成局部双链。
3.延伸(68℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活
性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′ 端延
伸,合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。
现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。
2楼2014-10-22 09:50:41
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3楼2014-10-22 16:11:58
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