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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 碱性磷酸酶标记物的稳定性
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lairena

铜虫 (初入文坛)

[交流] 碱性磷酸酶标记物的稳定性 已有6人参与

最近做一个单克隆抗体标记碱性磷酸酶的实验，用的是戊二醛一步法，标记后活性还是可以的，但是配制成酶结合物后放置段时间活性出现较大的下降，不知道什么原因，酶稀释液应该没多大问题，因为之前用来稀释别的酶结合物稳定性一直很好，酶和抗体本身应该也没多大的问题，而且仅仅是测试酶的催化活性的话（类似于生化试剂测试AP酶活性），也没问题，会不会是偶联后的AP酶联物还会发生分解或者聚集？还是什么原因，盼望高手给指导指导。
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1楼 2014-10-21 22:41:02
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hollyjiang

铜虫 (初入文坛)
★
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楼主的意思是这样的吗？你用AP酶标记了一个单克隆抗体，把它稀释到酶稀液中放一段时间，单纯AP酶活不怎么下降，但做免疫反应时活性下降很明显。这个跟原料、标记方法都有关吧，你说的情况也有可能，我也遇到这样的问题，现在还没有解决
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一定要签名嘛
2楼2014-11-19 14:44:58
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zhou19831121

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你们的标记方法？不胜感谢
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3楼2015-07-28 22:17:06
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蔡小蕾99

新虫 (小有名气)
用什么溶解alp

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4楼2017-07-20 17:25:38
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1164588582

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by zhou19831121 at 2015-07-28 22:17:06
请问你们的标记方法？不胜感谢

您好，我也是遇到这样的问题，刚标记出来的时候，酶的活性还好，可是在37度和2到8度，放置了一周后两者 酶活性相差很大，并且2到8度跟开始刚标记出来的也是相差比较大，想问问大家是怎么处理的
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5楼2018-12-06 15:11:14
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1164588582

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by hollyjiang at 2014-11-19 14:44:58
楼主的意思是这样的吗？你用AP酶标记了一个单克隆抗体，把它稀释到酶稀液中放一段时间，单纯AP酶活不怎么下降，但做免疫反应时活性下降很明显。这个跟原料、标记方法都有关吧，你说的情况也有可能，我也遇到这样的问 ...

请问你们的问题已经解决了吗？我最近也是遇到这样问题
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6楼2018-12-07 09:11:17
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prthefu

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主你好，我看下面几个虫友都评论说遇到了相同的问题，或是新手请教标记的具体方法，希望看到评论后分享一下经验吧，感谢了。
本身论坛就是供大家互相交流、共同进步的，你说呢。
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
7楼2019-01-23 11:38:17
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何超小

金虫 (著名写手)
请教一下你们标记的方法

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8楼2020-04-27 12:22:17
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