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CheminfoX金虫 (小有名气)
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[求助]
求助神经氨酸酶抑制剂抑制常数的详细测定方法，谢谢
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求大神指导指导下面两个问题，越具体越好，最好有参考文献，非常感谢： 1. 神经氨酸酶抑制剂抑制常数Ki的详细测定方法； 2. 探究目标化合物与阳性对照物的神经氨酸酶抑制活性是否存在协同作用的实验方案设计； |
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CheminfoX
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CheminfoX: 回帖置顶 2014-10-23 22:21:15
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山东大学刘瑜和谢元超这两篇论文很好，我是看了之后想到这两个问题的，但里面Ki测定方法不够详细。江宏磊这一篇文章讲的比较详细。第二个问题，我查了文献，没怎么懂协同作用的联合指数(CI)是如何测出来的，看了一篇下面这篇文章更是觉得迷糊：Chou T C. Drug combination studies and their synergy quantification using the Chou-Talalay method[J]. Cancer research, 2010, 70(2): 440-446.。求指导  |
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2014-10-23 22:20:50, 385.71 K
6楼2014-10-23 22:21:04
2楼2014-10-17 17:25:49
CheminfoX
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3楼2014-10-20 10:03:00
【答案】应助回帖
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CheminfoX: 金币+10, ★有帮助, 虽然不对，但至少查了，谢谢 2014-10-22 20:18:11
CheminfoX: 金币+10, ★有帮助, 虽然不对，但至少查了，谢谢 2014-10-22 20:18:11
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神经氨酸酶抑制活性测定在Potier方法 [8] 的基础 上进行了改进。测定在96孔荧光酶标板中进行，反 应体系总体积为100μL，样品用DMSO溶解。步骤如 下：每孔依次加入33mmol/L MES缓冲液(含5mmol/L CaCl 2 ，pH6.5)70μL 、待测样品(阴性对照为DMSO， 阳性对照为扎那米韦)10μL、0.3U/mL神经氨酸酶 10μL，振荡混匀1min，37℃孵育3min，测定荧光值 F 1 。然后加入80mmol/L底物MUNANA 10μL，充分 混匀，37℃反应15min后测定荧光值F 2 。设定参数： 激发光E x =355nm，发射光E m =460nm。计算抑制率， 公式为：抑制率(%)=[(F 2 -F 1 ) 对照 -(F 2 -F 1 ) 样品 /(F 2 -F 1 ) 对照 ]× 100。扎那米韦(0.1mg/mL)抑制率为53.2% |
4楼2014-10-22 20:01:20
