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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

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[求助] 用confocal观察植物根尖如何消除自发荧光干扰已有2人参与

本人用confocal观察植物植物组织，植物根茎叶均有自发荧光，与转入荧光蛋白及荧光染料相互干扰，请做过该方面的高手给予指导~~另本想手撕叶片表皮细胞，但撕下来的表皮细胞仍残留有很多叶绿素，很难撕干净，望指点~~不胜感激~~

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1楼 2014-10-16 11:15:45

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梦昕晨阳

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

我也遇到过有自发荧光的样本，我建议有两个办法：
1、自发荧光一般波长有限，所以可以选择波长较长的红色荧光染料进行靶蛋白的定位；
2、如果选用蓝色或绿色荧光染料，目的蛋白在组织上的分布应该是与对照组有差异的，此时务必设置对照组，然后通过调节激发光强度、增益等参数把对照组调弱，这样相应的实验组上荧光可能就能看到了。
仅供参考，有实验的话希望能再讨论。