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于德斌

金虫 (正式写手)

[交流] 为什么鸡脾脏中蛋白这么少? 已有1人参与

我最近提取鸡脾脏中总蛋白做WB,可是跑胶染色后,蛋白条带非常少,是不是脾脏中就这么些蛋白啊。我的目的条带还不在这里面。下面有图

为什么鸡脾脏中蛋白这么少?
IMG_20141007_090553.jpg
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知识就是力量
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shaoliwei00

金虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的脾脏是怎么处理的啊?
每天努力一点点,进步一点点
2楼2015-03-01 16:20:22
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shaoliwei00

金虫 (初入文坛)

我今年也做了脾脏里面的蛋白,开始有一个蛋白就做不出来,后来把脾脏处理了一下,就又做出来了
每天努力一点点,进步一点点
3楼2015-03-01 16:21:13
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shaoliwei00 at 2015-03-01 16:21:13
我今年也做了脾脏里面的蛋白,开始有一个蛋白就做不出来,后来把脾脏处理了一下,就又做出来了

我的是用液氮在研钵里研磨,提取的总蛋白。脾脏样品在-80保存的。你的是怎么处理的
知识就是力量
4楼2015-03-02 09:44:52
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shaoliwei00 at 2015-03-01 16:21:13
我今年也做了脾脏里面的蛋白,开始有一个蛋白就做不出来,后来把脾脏处理了一下,就又做出来了

我做一个PI3K,始终做不出来,用了两家公司的抗体都做不出来
知识就是力量
5楼2015-03-02 09:45:38
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shaoliwei00

金虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你做出来了吗?脾脏里面的红细胞会影响蛋白的纯度,所以先把脾脏里面的红细胞去除
每天努力一点点,进步一点点
6楼2015-04-10 11:45:58
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shaoliwei00

金虫 (初入文坛)

你买一瓶红细胞裂解液,我买的Sigma的,上面有具体的操作步骤,红细胞裂解完以后再按照常规步骤提取就行
每天努力一点点,进步一点点
7楼2015-04-10 11:47:05
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shaoliwei00 at 2015-04-10 11:47:05
你买一瓶红细胞裂解液,我买的Sigma的,上面有具体的操作步骤,红细胞裂解完以后再按照常规步骤提取就行

有具体的文献支持吗
知识就是力量
8楼2015-04-10 15:17:11
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shaoliwei00 at 2015-04-10 11:45:58
你做出来了吗?脾脏里面的红细胞会影响蛋白的纯度,所以先把脾脏里面的红细胞去除

还没做出来,一个抗体重新买了还没做出来,有的抗体就直接做出来了
知识就是力量
9楼2015-04-10 15:17:48
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于德斌

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shaoliwei00 at 2015-04-10 11:47:05
你买一瓶红细胞裂解液,我买的Sigma的,上面有具体的操作步骤,红细胞裂解完以后再按照常规步骤提取就行

还有个问题,你如果用了红细胞裂解液的话,怎么操作。我是用液氮研钵提取组织蛋白
知识就是力量
10楼2015-04-10 15:19:50
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