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金虫 (正式写手)

[交流] ~~~毕赤酵母优化及发酵相关探讨!!!

呵呵各位大侠踊跃发表你们的意见,偶有以下几个问题,希望大家能指教一二,thanks~~
偶现在用pPIC9K转GS115表达了一个目的蛋白,现在有对它的培养基进行优化然后上罐发酵,目前有好几个问题想各位能帮我解决一下,谢谢哈~~
1,毕赤有好几种表达培养基BMGY/BMMY,BSM和 FM22三种,我想问下,哪种更适合于发酵,有什么特别要注意的么?
2,偶在用BMGY/BMMY进行摇瓶优化时,因为在转接于BMMY中需要离心去菌体,这样很容易染菌,我想问的是有什么方法可简化这个步骤,或者不离心直接进行诱导可以么?
3,一般进行诱导表达时,酶活力最高是在72~96小时的时候对吧,,它进行菌种生长及转接诱导表达的时候,初始诱导OD是多少丫?OD是如何确定下来的?
4,其实还有一些问题,边讨论的时候再边提出来吧
最后在次谢谢各位大侠的帮忙了,呵呵
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