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[求助]
希望微生物专业的虫友给予帮助已有12人参与
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| 本人是植物学专业的，最近我们老师和微生物老师联合做一课题，给我了两株保存了一段时间的菌种，我需要用菌悬液做实验，请问各位虫友在制备菌悬液之前需要做哪些处理，不胜感激 |
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【答案】应助回帖
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给你的是细菌还是霉菌？如果是细菌，一般是保存在石蜡油里面，你可以配制牛肉膏蛋白胨培养基，然后无菌条件下用移液枪移取200ul左右的保存液到新鲜的一灭菌的培养基中，振荡培养24h以上，可以选择测定od值或者稀释涂布平板法来确定菌数，这样就得到了原始菌种。如果是霉菌之类的丝状菌，一般保存的是他们的孢子，通常是甘油保存或者斜面试管保存，如果是甘油保存，在超净台上用接种环重新将孢子接种在新鲜斜面试管里面，五天以后出现孢子，然后向试管里面加入适量生理盐水，将孢子洗下来，测定它的孢子数目（血平板或者稀释涂布都可以），这样就得到了原始孢子液种；要是原来就是保存在斜面试管中的霉菌，就直接加适量生理盐水就可以了，然后就是一样的操作了。 将你要发酵的材料进行辐照灭菌（或者就在搪瓷盘中铺上很薄的一层，直接放在超净台里开紫外灯灭菌，灭菌时间根据你的材料多少来定，建议3天以上），然后将原料分装到已经灭过菌的发酵容器里面（可以是小烧杯或者小锥形瓶，并用8层以上纱布封口），吸取200ul~1ml菌液接种到材料上，可适当补加一点无菌水，纱布密封，进行培养。培养期间，注意观察原料水分是否充足，不足应给与补充，推荐使用一次性无菌注射器加水，这样就不用把纱布拆下来了。 切记！避免染菌！否则前功尽弃！ |
26楼2014-10-20 19:52:13
quiller2000
木虫 (著名写手)
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- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2014-10-11 21:01:19
3楼2014-10-12 15:11:17
4楼2014-10-12 17:23:58