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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 高GC含量基因PCR扩增不出条带
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咆粑

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
313cr(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 14:57:25
楼主说用KOD的酶P过一次特异性不好，那是否有你要的条带呢？如果有提高退火温度试试，可以多设计几个退火温度。祝成功！
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11楼2014-10-15 10:41:42
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用过宝生物primerstar with GC buffer，扩GC含量60%基因
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12楼2014-10-15 13:07:24
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-10-11 16:08:28
primerstar with GC buffer  你试试 我75%多的GC可以扩出来

GC buffer TAKARA有卖吗？我引物的GC超过75%了，怎么都P不出来
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13楼2015-04-24 18:52:39
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-10-13 17:17:35
我的还82%GC,也是扩不出来，求交流

请问解决了吗？我上游引物的GC达到86了
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14楼2015-04-24 18:53:43
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冰艺于欣然

新虫 (小有名气)
楼主问题解决了吗？我也是引物超高GC，P不出来
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15楼2015-04-24 18:55:30
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2015-04-24 18:55:30
楼主问题解决了吗？我也是引物超高GC，P不出来

我后面扩基因组了，CDS扩不出来

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16楼2015-04-25 07:06:34
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2015-04-24 18:53:43
请问解决了吗？我上游引物的GC达到86了...

天恩泽公司有一个高gcDNA清除剂。我觉得应该是一个pcr促进剂。可以试试。

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17楼2015-04-25 10:51:17
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2015-04-24 18:52:39
GC buffer TAKARA有卖吗？我引物的GC超过75%了，怎么都P不出来...

takara PRIMER STAR with GC buffer
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
18楼2015-04-26 15:02:01
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 冰艺于欣然 at 2015-04-24 18:55:30
楼主问题解决了吗？我也是引物超高GC，P不出来

takara PRIMER STAR with GC buffer
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
19楼2015-04-26 15:02:32
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居里夫人

新虫 (初入文坛)
我的是进行基因型鉴定需要P 200,300bp的条带，GC含量为61％，用这个可以吗？

发自小木虫Android客户端
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20楼2018-07-12 23:46:57
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