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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 体外转录RNA，为什么会出现2条带
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tuo040201

新虫 (初入文坛)
请问你解决这个问题了吗？我们最近也一直被同样的问题困扰，不知道应该怎么办
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11楼2014-11-03 11:10:48
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gu666hong

银虫 (小有名气)
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11楼: Originally posted by tuo040201 at 2014-11-03 11:10:48
请问你解决这个问题了吗？我们最近也一直被同样的问题困扰，不知道应该怎么办

解决了，我就把它纯化以后就没有杂带了，
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12楼2014-11-03 19:53:27
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tuo040201

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by gu666hong at 2014-11-03 19:53:27
解决了，我就把它纯化以后就没有杂带了，...

怎么纯化？线性化模板纯化还是探针纯化？我模板也纯化过了，但是还是两个条带
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13楼2014-11-03 23:31:39
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gu666hong

银虫 (小有名气)
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13楼: Originally posted by tuo040201 at 2014-11-03 23:31:39
怎么纯化？线性化模板纯化还是探针纯化？我模板也纯化过了，但是还是两个条带...

模板单酶切，纯化以后转录，加DNase l然后纯化，纯化以后我跑胶看了下只有一条带了。

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14楼2014-11-04 12:39:10
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gu666hong

银虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by gu666hong at 2014-11-04 12:39:10
模板单酶切，纯化以后转录，加DNase l然后纯化，纯化以后我跑胶看了下只有一条带了。
...

我这没涉及探针，

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15楼2014-11-04 12:40:04
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tuo040201

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by gu666hong at 2014-11-04 12:40:04
我这没涉及探针，
...

我们是体外转录RNA，作为原位杂交的探针，体外转录和你的是一样的，不知道你用什么方法纯化，我单酶切模板用天根的普通DNA纯化试剂盒，转录的RNA用Licl和无水乙醇沉淀，请问你是怎么纯化的？
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16楼2014-11-04 16:32:49
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gu666hong

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by tuo040201 at 2014-11-04 16:32:49
我们是体外转录RNA，作为原位杂交的探针，体外转录和你的是一样的，不知道你用什么方法纯化，我单酶切模板用天根的普通DNA纯化试剂盒，转录的RNA用Licl和无水乙醇沉淀，请问你是怎么纯化的？...

买的RNA纯化试剂盒，全市金的

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17楼2014-11-04 18:00:45
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hrjailjg

新虫 (初入文坛)
请问您的模板是怎么弄的
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18楼2014-11-23 02:42:04
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萱若blue

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by gu666hong at 2014-11-04 18:00:45
买的RNA纯化试剂盒，全市金的
...

我想请问一下你RNA纯化的试剂盒的货号  我最近也在做体外转录
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19楼2016-01-19 10:57:34
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