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woxiang

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外检测器 已有2人参与

最近做实验遇到一个棘手的问题,高效毛细管电泳用的紫外检测器,出的峰随着迁移时间增加,峰越来越宽,高效液相(紫外检测器)也是如此,导师告诉我这是紫外检测器的特性,跟被测物无关,让我自己查资料弄明白是怎么回事,我找了很久也没看到相关的资料,有没有高手可以给与详细解答一下,谢谢。
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这跟什么检测器无关,是色谱本身的性质。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-10-06 21:29:59
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woxiang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2014-10-06 21:29:59
这跟什么检测器无关,是色谱本身的性质。

能否说一下,具体和色谱本身有什么关系
3楼2014-10-07 08:08:32
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
woxiang: 金币+5, 有帮助 2014-10-07 21:56:44
这个与检测器的原理真没关系,但与检测器的死体积相关。在色谱分离中,时间越长,扩散越大(纵向扩散、涡流扩散、多路径效应),色谱峰就越宽;死体积越大(死体积有连接管路、柱体积、检测池体积等),扩散越大。一般梯度洗脱(液相)或程序升温(气相)等方式可以改善峰型。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
4楼2014-10-07 09:15:27
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woxiang

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by kf1009 at 2014-10-07 09:15:27
这个与检测器的原理真没关系,但与检测器的死体积相关。在色谱分离中,时间越长,扩散越大(纵向扩散、涡流扩散、多路径效应),色谱峰就越宽;死体积越大(死体积有连接管路、柱体积、检测池体积等),扩散越大。一 ...

能否详细说一下,梯度洗脱对改善峰形的影响(梯度洗脱能减小扩散还是减小死体积),新手不太懂,谢谢
5楼2014-10-07 22:01:10
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lzyhqy123

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2014-10-07 23:00:26
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456895

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2014-10-08 08:07:32
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woxiang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 456895 at 2014-10-08 08:07:32
看来你的导师不太懂啊,峰的展宽是组分在色谱柱中扩散所致。具体的可以百度色谱分离的原理,也可以看看三种色谱理论。

刚做不太懂,老师一说没敢细问,可能我理解错误
8楼2014-10-08 08:49:31
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)

哦,这导师,真是的,怎么误导人呢
紫外检测器,不会对峰的宽度,峰型造成任何影响。随着使用时间的延长,可能因为灯寿命,检测器吸尘,化学涂层降解等原因,造成噪声增加,检测效率减少,即信噪比的降低。这个效应是长期的,不会在几次时间相近的检测中看出。
能影响峰的基本上就是色谱这一部分,包括流动相的成分,浓度,流速,梯度等,以及柱子使用过程中产生的各种问题,还有就是流路的堵塞,泄漏和死体积。这一部分比较复杂,建议你多看书,多实践。
9楼2014-10-08 11:12:18
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