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香水有毒871

木虫 (正式写手)

[交流] 求助PAGE电泳后核酸的银染?

我在在聚丙烯酰胺凝胶电泳后,进行核酸的银染,结果显色的时候,显得太深了。条带看不清楚了。
不知道还有补救措施吗?

银染步骤如下:
(1)于10%乙醇+0.5% 冰醋酸溶液中固定15 min;漂洗2次,每次5Min;(2)于0.2 %AgNO3溶液中浸泡15min;(4)用去离子水充分漂洗1次,10s;(5)于3 %NaOH + 0.5 %甲醛溶液中适度显色;(5)加入10%乙酸终止染色。
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辛雨237

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
不知道有没有补救措施
第四步,我一般都是用去离子水漂洗3次的
春暖花开
2楼2008-04-27 16:21:14
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香水有毒871

木虫 (正式写手)

谢谢辛雨237的帮助。
3楼2008-04-27 23:08:55
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叶子1983

铜虫 (小有名气)

反而第四步要快一些,不能超过5s呢,要尽快转移入显色液里
4楼2008-04-28 08:58:15
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fln0809

银虫 (正式写手)

呵呵,我个人觉得第四步漂洗时间短的话,显色时间快,但背景也出的挺快的,我前两天试过一次漂洗10s的,但结果带显得很快,背景也出的很快,我现在是控制在两分以内,还行,楼主或许可以试一下!
每天都给自己一个微笑!
5楼2008-04-28 09:23:26
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fln0809

银虫 (正式写手)

漂洗两到三次,呵呵!
每天都给自己一个微笑!
6楼2008-04-28 09:58:37
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香水有毒871

木虫 (正式写手)

谢谢兄弟姐妹的帮助和支持,我会参考您们建议的,感谢。
7楼2008-04-28 18:10:42
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