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关谷小杰

新虫 (初入文坛)

[求助] 福林酚法测出来有酚的存在,为什么液相跑不出来

我用的乙醇80%乙醇提食用菌里面的多酚,提完旋蒸过大孔树脂,得到的样品用福林酚测出来含酚,可是液相就是跑不出来。后来我换的50%丙酮提,还是测不出来含多酚。不管是粗样还是过完柱子的。。。
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city1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一点都不奇怪,我碰过N次。有时候明明是有东西的,跑板就是跑不出来,要改进方法。
另外,folin-C也可以测蛋白的。
2楼2014-10-01 17:48:10
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city1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
关谷小杰(zybpxy代发): 金币+5, 鼓励应助··请继续关注此贴,请在解决问题之后PM斑竹,我们将给与评分 2014-10-01 18:39:26
不知道你是否确定菌里是否有多酚。建议粗提出来后在过柱前,先用folin-c测下有没有多酚。对于多酚来说,folin-c法应该是比较灵敏的方法,若有的话,应该是能看出来的。你在粗提前测一测,就可以大体判断是否由大孔树脂引起的,比如说大孔树脂吸附了多酚,而没解吸出来,所以导致你收集的馏分没检测到。但是这样也有点夸张,因为你说的是完全没有检测出来,目前应该没这么牛叉的树脂有百分百的吸附率。
因此,你的样品里面的多酚含量低是一个可能的因素。
3楼2014-10-01 17:54:13
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
液相跑不出来是什么意思?是指在预期时间没有出峰?
建议把液相时间改长一点,流动相的变化范围变宽一点,看看是不是能够冲出来
4楼2014-10-01 21:07:26
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99503102

版主 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by city1 at 2014-10-01 17:54:13
不知道你是否确定菌里是否有多酚。建议粗提出来后在过柱前,先用folin-c测下有没有多酚。对于多酚来说,folin-c法应该是比较灵敏的方法,若有的话,应该是能看出来的。你在粗提前测一测,就可以大体判断是否由大孔树 ...

楼主好像说的是过大孔树脂以后用福林酚法测多酚是能够测出来的吧?我觉得楼主问题说的不清楚,福林酚法一般测的是总酚,而液相一般跑的是单酚、酚酸这些,楼主说的用液相测多酚是什么个意思呢。。。
微信公众号:食安小屋
5楼2014-10-03 00:31:12
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主,建议你把问题说清了,然后让大家给你分析问题。我之前用液相测多酚的时候,都是用的很多酚类的混标,测的都是单种酚类物质的含量,没有测总酚这种的。
微信公众号:食安小屋
6楼2014-10-03 00:33:32
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terry_neu

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
现在看来一点都不奇怪,我碰过N次。有时候明明是有东西的,跑板就是跑不出来,要改进方法。
另外,folin-C也可以测蛋白的。
7楼2014-10-03 08:01:13
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丑是丑了点

金虫 (著名写手)

应该先做个紫外全扫描,看一下吸收波长,再用HPLC测摸条件
上帝赐牛奶,桶要自己买
8楼2014-10-03 10:16:37
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doctorcui

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

福林酚法还可以测定酪氨酸的酚羟基,蛋白酶活力也是基于这一原理测定。希望能帮到你!
做减法
9楼2014-10-04 16:46:46
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关谷小杰

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by city1 at 2014-10-01 17:54:13
不知道你是否确定菌里是否有多酚。建议粗提出来后在过柱前,先用folin-c测下有没有多酚。对于多酚来说,folin-c法应该是比较灵敏的方法,若有的话,应该是能看出来的。你在粗提前测一测,就可以大体判断是否由大孔树 ...

是我问题没有解释清楚,就是我用水提醇沉法,还有丙酮提取,乙醇提取出来的粗样,冻干后用水溶解,再以没食子酸为标准品,用福林酚法测,测出来的结果是有酚的。后来我用大孔树脂纯化之后得到的样品,用福林酚法测也是有的,因为想检验样品里酚的种类还有含量,所有就尝试用HPLC检测,可是试过很多流动相和各种方法,跑出来的图只有前面的溶剂峰。。。后面全是基线。
10楼2014-10-13 21:42:25
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