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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » LB 培养细菌 2-3h 菌死亡
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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被占了

银虫 (小有名气)

[求助] LB 培养细菌 2-3h 菌死亡 已有2人参与

最近我们实验室出现了比较诡异的症状，话不多说，进入正题：
   细菌培养：LB都是同一批次配制的，10g/L NaCl, 5g/L yeast extract  10g/L tryptone， 从来没有调过PH
    不管是用于小量表达的试管还是用于大量表达的锥形瓶也都是同样洗刷刷的，而后一起高压。
   不正常的是：LZ的遭遇——同时大量表达3个不同的PET-32a-genes，头一天晚上，用试管接菌，37℃ 180rpm 培养过夜，细菌培养正常的一如既往。
第二天转接入1L LB 锥形瓶，1:50接菌，37℃ 180rpm 培养3h后，正当LZ取出锥形瓶准备加IPTG时，发现其中2瓶菌的浑浊程度正常，另外一瓶里面澄清，有少量絮状沉淀，细菌已死。
  今天早晨，一个师妹也反映了同样的情况，她是用试管摇菌培养过夜的，有几管菌就是死了，早晨过来试管澄清，有少许絮状沉淀。
求大神指点！！！
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没有等出来的辉煌，只有做出来的成功。
1楼 2014-09-28 10:50:03
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
被占了(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:13:23
根据经验来看,你中奖了,是噬菌体污染了,要把所有用过的瓶瓶管管用次氯酸钠溶液泡过,还要把相关试验设备和台面用溶液喷洒
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星陈代谢
2楼2014-09-29 11:29:10
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zylx

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
被占了(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:13:31
很有可能是噬菌体污染啊，有必要做一个噬菌斑实验；有条件最好电镜扫描一下
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3楼2014-10-03 00:54:20
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zylx

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
被占了(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:13:44
引用回帖:
2楼: Originally posted by kx444555 at 2014-09-29 11:29:10
根据经验来看,你中奖了,是噬菌体污染了,要把所有用过的瓶瓶管管用次氯酸钠溶液泡过,还要把相关试验设备和台面用溶液喷洒

这样效果都不是很好的，真的由噬菌体了要做到所有设备，人员都消毒，消毒最好采用甲醛熏蒸。安全一些的就是臭氧消毒了，其他的弥散效果不好；另外就是要时常保持实验室卫生了；现在好多实验室的情况是大家都用一种载体，而且有菌液溢出也没有人做消毒工作；这是实验室的通病，表示理解
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4楼2014-10-03 00:58:48
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疯人疯语一号

新虫 (初入文坛)
你好，请问怎么解决的，我也出现了这种情况

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5楼2018-04-13 14:49:50
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