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dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 提RNA 已有4人参与

初提RNA,想问问提RNA的材料是不是必须得用液氮存样呀?我要提植物叶片,要去外地采样,我可以剪下枝条插在花泥上带回来,再放入液氮中保存到-80冰箱吗?从外地回来大概4、5个小时,后面要做qPCR,请问会对实验有影响吗?
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foodwl

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 17:53:22
表示你可以带一个保温桶装上液氮,取完样后直接液氮冷冻再带回来,放到-80℃就OK了,很好用
5楼2014-09-26 08:12:40
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永远不变色

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-25 21:01:04
有人做过对照实验,当组织拿来之后只要马上作而且一定不过夜,也就是不超过24小时,降解都不是很厉害,但是也不一定要看组织自身含有RNA酶的量,不知道楼主植物中的树叶RNA酶量,按照理论来说,植物细胞有细胞壁等一些结构,可能会好一些。但最好是放入小型液氮罐或是冰桶中,马上作,如果在外地能带活体就最好。即使回来再晚也要把它提取完,因为在DNA和蛋白质存在的情况下一般RNA会降解的很厉害。
2楼2014-09-25 16:32:39
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陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 17:53:07
看你采集完材料要隔多长时间处理组织了,如果很快的话,没有太大影响,但是为了保证质量,还是尽量冷冻吧。而且即使在冷冻状态下,材料保存也是有一定的期限的。
人生中的悲剧太多了
3楼2014-09-25 21:26:06
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 17:53:14
做定量还是有影响的,建议用液氮罐携带
行到水穷处,坐看云起时
4楼2014-09-25 22:49:20
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