应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 学术帮助 » 痘病毒重组反筛 急急急!!!
31/1返回列表
查看: 412  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

张晓彩

新虫 (初入文坛)

[求助] 痘病毒重组反筛 急急急!!!

请教各位一个问题，我最近在做痘病毒的重组，已经将EGFP插入到左右同源臂之间了，现在在进行反筛，就是将我的带有左右同源臂的目的基因替换掉EGFP，但是看荧光的时候很多不带光的，然后就扩大培养了一代PCR鉴定，发现条带大小符合最原始的未插EGFP的野毒，同时也鉴定了质粒和重组好的亲本毒都没有污染，是什么原因呢，请大侠指点迷津啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-09-25 10:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古水世承

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也是学生物的，你在看荧光的时候，本身就有很多不带光的，pcr之后，带荧光的肯定会更少，因为会把它稀释。你可以试试先进行反筛，再做PCR

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-27 07:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张晓彩

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 古水世承 at 2014-09-27 07:53:26
我也是学生物的，你在看荧光的时候，本身就有很多不带光的，pcr之后，带荧光的肯定会更少，因为会把它稀释。你可以试试先进行反筛，再做PCR

我的重组病毒是重组上EGFP的，应该有光，没光的不应该是重组上我的目的基因的吗  但是pcr之后不是呢  为什么呢
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-30 10:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张晓彩 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料080500调剂求收留 +4 一颗meteor 2026-03-13 4/200 2026-03-19 10:32 by 30660438
[考研] 求材料调剂 +10 隔壁陈先生 2026-03-12 10/500 2026-03-19 09:15 by 无际的草原
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 材料专业求调剂 +5 hanamiko 2026-03-18 5/250 2026-03-18 20:19 by 星空星月
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +3 我爱生物生物爱� 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:12 by macy2011
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭