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xxve

木虫 (小有名气)

[交流] 关于毕赤酵母真核表达

大家好,我现在有两个基因需要表达,一个是分泌性蛋白,一个是非分泌性蛋白.现在准备在毕赤酵母中进行表达,看了相关文献,自身为分泌性蛋白的基因在PPIC9K中进行表达时,插入的是编码成熟肽蛋白的核苷酸序列(即去掉信号肽的CDNA序列,但我的信号肽本身就是通过软件预测的,怕直接冒失的去掉,会在毕赤酵母中表达时没有活性,但不知道为什么不能直接把整个CDNA插进PPIC9K进行表达呢,而且像这样的情况想直接找编码成熟蛋白序列应当怎么办?):还有另一个基因是编码非分泌性蛋白的,这种基因是不是可以直接把整个CNDA全长转入PPIC9K进行表达呢?谢谢各位了,
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xiongxianghua

新虫 (初入文坛)

酵母中分泌表达也不是不可以用外源蛋白自身信号肽,如人血清白蛋白的自身信号肽在毕赤酵母中就可以用,而且分泌效果很好。问题是要看外源的信号肽能否为酵母所识别,能不能行得试了才知道。
3楼2008-04-25 11:13:06
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

是的,理论是可以的。还要看运气和实验操作。
2楼2008-04-25 00:05:06
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