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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)

[求助] 液质联用 已有2人参与

我最近打算去做大鼠含药尿液和粪便的液质，是不是不需要用考虑尿液和粪便里面的药含量高低问题，只需要简单预处理即可吗？我已经做过预实验了，尿液和粪便中含药量都特别高
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1楼 2014-09-23 15:01:35
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
需要预处理的，你之前怎么处理的样品，试试液液萃取吧
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2楼2014-09-23 16:02:04
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listentome

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
尿液和粪便通常用SPE预处理一下，这样化合物可以更好的富集也可以减少基质效应
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3楼2014-09-23 17:01:39
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by listentome at 2014-09-23 17:01:39
尿液和粪便通常用SPE预处理一下，这样化合物可以更好的富集也可以减少基质效应

我们所需成分极性比较大，不适合SPE。我做的处理是首先进行稀释，然后甲醇除蛋白、提取，涡旋离心后取上清液。我想知道用超纯水稀释尿液和粪便提取液可以吗？
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4楼2014-09-23 19:17:31
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-09-23 16:02:04
需要预处理的，你之前怎么处理的样品，试试液液萃取吧

尿液：用超纯水稀释50倍，稀释尿液作为原生物样品。取稀释后尿液一定量，加入甲醇适量，涡旋，离心，取上清液。
粪便：1克粪便用3ml甲醇研磨，超声，离心。取上清液，用超纯水稀释100倍。取稀释后粪便上清液一定量，加入甲醇适量，涡旋，离心，取上清液。
上面是我预处理的方法，觉得合理吗？
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5楼2014-09-23 19:24:21
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 夕颜丹629 at 2014-09-23 19:24:21
尿液：用超纯水稀释50倍，稀释尿液作为原生物样品。取稀释后尿液一定量，加入甲醇适量，涡旋，离心，取上清液。
粪便：1克粪便用3ml甲醇研磨，超声，离心。取上清液，用超纯水稀释100倍。取稀释后粪便上清液一定量 ...

稀释这么多倍，样品的信号怎么样？处理完的上清液，再加2-3倍体积的乙腈，高速离心之后看看有没有蛋白沉淀产生，没有的话应该可以进液质检测。
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6楼2014-09-23 19:38:34
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-09-23 19:38:34
稀释这么多倍，样品的信号怎么样？处理完的上清液，再加2-3倍体积的乙腈，高速离心之后看看有没有蛋白沉淀产生，没有的话应该可以进液质检测。...

对呀，药液浓度实在太高了！我想问问为什么用乙腈看看有无蛋白沉淀呢？甲醇有沉淀蛋白和提取药液的作用，我的流动相是甲醇-醋酸水，如果用乙腈除去蛋白，进液相之前就无法将乙腈除去。
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7楼2014-09-23 20:19:00
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 夕颜丹629 at 2014-09-23 20:19:00
对呀，药液浓度实在太高了！我想问问为什么用乙腈看看有无蛋白沉淀呢？甲醇有沉淀蛋白和提取药液的作用，我的流动相是甲醇-醋酸水，如果用乙腈除去蛋白，进液相之前就无法将乙腈除去。...

乙腈沉淀蛋白的能力比甲醇强，可以用乙腈看你处理的样品是否将蛋白沉淀干净了，如果沉淀干净了，就可以用之前的处理方法处理后直接进行检测了。乙腈只是作为一个验证。
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8楼2014-09-23 22:41:21
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-09-23 22:41:21
乙腈沉淀蛋白的能力比甲醇强，可以用乙腈看你处理的样品是否将蛋白沉淀干净了，如果沉淀干净了，就可以用之前的处理方法处理后直接进行检测了。乙腈只是作为一个验证。...

好的，我去试试，谢谢！
我的药液浓度大概在0.02ug/ul，这样浓度进液质是不是有点高呢？
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9楼2014-09-24 11:51:19
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
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9楼: Originally posted by 夕颜丹629 at 2014-09-24 11:51:19
好的，我去试试，谢谢！
我的药液浓度大概在0.02ug/ul，这样浓度进液质是不是有点高呢？...

是挺高的。不过也要看你的化合物的信号响应。你可以先稀释个浓度比较低的，如果检测不到，再试试浓度高的，直接进高浓度的可能会把离子源污染了。
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10楼2014-09-24 14:34:15
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