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马立horse

新虫 (小有名气)

[求助] 紫外中金属配合物与DNA的键合常数的计算 已有1人参与

各位,近期做了金属配合物与CT-DNA的结合的紫外表征,根据[DNA]/(εa-εf)=[DNA]/(εb-εf)+1/[Kb(εb-εf)]计算配合物与DNA的键合常数:
式中[DNA]表示实验中DNA溶液的浓度;εa为未与DNA发生作用时席夫碱钴配合物的摩尔吸光系数;εf为游离席夫碱钴配合物的摩尔吸光系数;εb为与DNA相互作用饱和时席夫碱钴配合物的摩尔吸光系数。
我的问题是:我无法理解其中的摩尔吸光系数到底是怎么来的,第一次做,求指导。问题解决,赏金一百金币。
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马立horse

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by gezailushang at 2016-08-13 15:43:00
您好,有个问题请教您,(εa-εf)我计算时,配合物的浓度是固定不变,那这个值是直接测试的吸光度减去初始吸光度再除以配合物的浓度?要不要考虑DNA加入后的配合物浓度的改变?谢谢!

如果你加入的DNA每次都是几微升,配合物是固定的几毫升,这完全不会影响配合物的浓度的,但随着DNA的加入,体积增加到一定程度是会有影响的,所以得具体情况具体分析
12楼2016-08-15 16:21:38
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匿名

用户注销 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
马立horse(西门吹雪170代发): 金币+50, 鼓励回帖交流 2014-09-24 13:52:16
本帖仅楼主可见
2楼2014-09-24 08:16:20
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马立horse

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by saddog at 2014-09-24 08:16:20
每一次的吸光度除以配合物的浓度

你好,首先谢谢你。我的配合物浓度是固定的啊?每次都一样吗?还有饱和时席夫碱钴配合物的摩尔吸光系数怎么理解,是最后一次加入DNA时的吸光系数吗?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-09-24 10:25:20
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匿名

用户注销 (小有名气)

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马立horse(西门吹雪170代发): 金币+50, 鼓励回帖交流 2014-09-24 13:51:52
本帖仅楼主可见
4楼2014-09-24 11:10:43
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