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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 大鼠排泄研究
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)

[求助] 大鼠排泄研究 已有3人参与

在大鼠灌胃给药后，尿液和粪便中代谢药物浓度很高，应该用什么溶剂进行稀释呢？尿液大概稀释50倍，粪便需要稀释100倍，我之前是用50%甲醇进行稀释的，是因为在做血液部分时，复溶使用的溶剂为50%，我现在稀释还用50%甲醇对吗？内标物是不是应该在稀释之后再加入进行定量？希望得到各位的指导，谢谢！！！
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1楼 2014-09-22 20:33:10
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zengrj1110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-09-28 12:26:43
夕颜丹629(wangkaibo123代发): 金币+5 2014-12-03 21:11:22
大鼠的尿液和粪便还是需要经过一定的处理的，就像血液处理一样，一般是除蛋白！然后吹干然后复溶，复溶的时候用50%的甲醇是可以的。内标的加入也是和血液处理一样，在前面加入即可，不是在复溶的时候加入的吧！也是建议去看些别人做代谢的文章，看看有处理尿粪便的，他们的处理步骤是什么，参考一下！希望对你有帮助。
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2楼2014-09-22 22:00:34
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zengrj1110 at 2014-09-22 22:00:34
大鼠的尿液和粪便还是需要经过一定的处理的，就像血液处理一样，一般是除蛋白！然后吹干然后复溶，复溶的时候用50%的甲醇是可以的。内标的加入也是和血液处理一样，在前面加入即可，不是在复溶的时候加入的吧！也是 ...

我觉得吹干复溶是不是不适合我的样品处理，因为里面药物浓度实在太高了，必须进行稀释，将稀释后的生物样品当做原样品再进行处理。
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3楼2014-09-23 11:59:56
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-09-28 12:26:50
应该用空白尿和空白粪匀浆液稀释，稀释后处理样品和未稀释时处理步骤一致。
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4楼2014-09-28 09:23:30
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Katharine3628

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-09-28 12:26:55
夕颜丹629(wangkaibo123代发): 金币+5 2014-12-03 21:11:36
1. 浓度高的样本应该用相应的空白样本稀释，但也不至于稀释50倍和100倍的，你是根据血样浓度来看需要稀释这么大倍数的吗？实际测样中，尿液、胆汁、粪便的浓度大于血浆样本浓度是很正常的，只是相应标曲浓度范围增加即可，无需将样本稀释至与血浆同步的范围。文献中多数是个别时间段样本稀释10倍以内即可，并进行相应的稀释QC的方法学考察。
2. 内标应该是吹干后，加入稀释的样本，涡旋后共同处理。
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5楼2014-09-28 12:11:05
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by renzhichu525 at 2014-09-28 09:23:30
应该用空白尿和空白粪匀浆液稀释，稀释后处理样品和未稀释时处理步骤一致。

我试试，但是我查文献里面，只有做标曲超过线性时候采取这种方法。谢谢！
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6楼2014-09-29 12:36:21
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 夕颜丹629 at 2014-09-29 12:36:21
我试试，但是我查文献里面，只有做标曲超过线性时候采取这种方法。谢谢！...

你的情况不就是样品浓度超过线性吗，难道你不是用标曲进行定量吗？
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7楼2014-09-30 08:13:53
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夕颜丹629

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by renzhichu525 at 2014-09-30 08:13:53
你的情况不就是样品浓度超过线性吗，难道你不是用标曲进行定量吗？...

是这样的情况。我意思是文献里面是空白和样品都通过同样的处理方法进行稀释，稀释后仍然有个别超过线性的采用稀释空白再进行稀释。
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8楼2014-10-09 09:34:47
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