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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 有用过ATP检测试剂盒的童鞋？请指点~~
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jixiaw

银虫 (正式写手)

[求助] 有用过ATP检测试剂盒的童鞋？请指点~~ 已有3人参与

我现在想用一个ATP检测试剂盒，希望使用酶标仪就能够完成，看了碧云天的要用luminometer，我现在是把细胞培养到96孔板里，有没有能直接在96孔板里完成的ATP检测试剂盒呀？看了南京建成的要加到500uL，96孔也装不下呀？有没有在96孔中做过ATP检测的童鞋，请指点~谢谢喔~
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1楼 2014-09-21 17:17:30
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jixiaw

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ixido at 2014-09-22 12:21:43
检测ATP含量可以用酶标仪，测发光值就可以。
如果想在96孔板中直接做的话，需要把样品裂解后才能测。如果你买的试剂盒里有裂解液的话，可以在细胞处理好后，把培养基吸出来，加裂解液，然后震荡把细胞破碎，加酶溶 ...

首先非常谢谢喔~`
此外还有个小问题，就是把96孔板的培养基吸出来之后，加入裂解液，再震荡把细胞破碎，不知这步的震荡破碎有没有专有的仪器可以直接震荡96孔板，应该不是把每个孔的细胞都取出来吧，第一次做，不太懂，请指点~
最后你说的这个promega试剂盒也是测细胞存活率的吗？谢谢~~
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3楼2014-09-22 15:32:37
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ixido

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检测ATP含量可以用酶标仪，测发光值就可以。
如果想在96孔板中直接做的话，需要把样品裂解后才能测。如果你买的试剂盒里有裂解液的话，可以在细胞处理好后，把培养基吸出来，加裂解液，然后震荡把细胞破碎，加酶溶液上酶标仪检测。裂解液的体积看你的细胞量和ATP含量调整就可以。
样品一定要裂解好，并且裂解后马上检测，否则会有偏差。

PS，promega的试剂盒测的很好，而且说明书写的很清楚。楼主可以借鉴一下。
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jixiaw
2楼2014-09-22 12:21:43
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ixido

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by jixiaw at 2014-09-22 15:32:37
首先非常谢谢喔~`
此外还有个小问题，就是把96孔板的培养基吸出来之后，加入裂解液，再震荡把细胞破碎，不知这步的震荡破碎有没有专有的仪器可以直接震荡96孔板，应该不是把每个孔的细胞都取出来吧，第一次做，不 ...

可以放在水平摇床上摇，也有专门用于96孔板震荡的仪器。

测ATP含量可以间接检测细胞存活率，promega有测ATP含量的kit，也有测细胞活力的kit
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4楼2014-09-23 08:37:12
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joe-zhang

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by ixido at 2014-09-21 16:21:43
检测ATP含量可以用酶标仪，测发光值就可以。
如果想在96孔板中直接做的话，需要把样品裂解后才能测。如果你买的试剂盒里有裂解液的话，可以在细胞处理好后，把培养基吸出来，加裂解液，然后震荡把细胞破碎，加酶溶 ...

我用过Promega的试剂盒，还可以。加入试剂后如果不马上测，ATP会迅速消耗。
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5楼2014-09-24 04:39:35
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