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张玲212013铜虫 (初入文坛)
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[求助]
荧光猝灭法测量聚集数
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小妹我初接触表面活性剂，先测量表面活性剂的聚集数。参照文献方法如下： 采用芘做荧光探针浓度为0.1微摩尔每升。cpc做荧光猝灭剂浓度范围在0.075-0.4mM之间。表面活性剂浓度为3倍的临近胶束浓度。激发波长选用335nm，发射波长选用373nm。测量加入cpc后溶液的荧光强度值Iq，以及未加cpc时的荧光强度值I0。做lnIq/I0与cpc浓度关系曲线，根据斜率求出聚集数量。可是为什么我求得的lnIq/I0的值非常大从0.7到3左右（I选用的是373nm处的荧光强度），而且做出的关系曲线不满足直线的关系这和文献都相差甚远啊 ，而且不是直线关系没法求得聚集数量啊。 那位做过这方面的实验然后告知小妹应注意的问题，以及该怎么解决呢？  U4(Z{8}{`B(%W[C22I0YRBO.jpg |
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HongzhenLin
金虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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张玲212013: 金币+10, 博学EPI+1, ★有帮助 2014-12-01 17:00:08
张玲212013: 金币+10, 博学EPI+1, ★有帮助 2014-12-01 17:00:08
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你的表面活性剂是什么？没有讲你操作的具体细节啊，很难判断你问题出在哪。 ln(Iq/I0)不可能是正值，应该是ln(I0/Iq)吧。不过这是小问题。 荧光染料分子要充分溶解，如果你是多个样品分别配制，要精确控制每个样品中染料的浓度。如果你是用的同一个样品逐步增加猝灭剂浓度，猝灭剂母溶液的浓度要足够高，以使滴加猝灭剂产生的体积变化可以忽略。这些都是常识，如果你已经做到了却还得不到满意结果，可能是你的表面活性剂浓度还不够高，加到6倍CMC左右看看。 |
2楼2014-09-23 13:42:06