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薄荷酥

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于液相 已有3人参与

为什么液相中的标准样都有分叉峰，用的是氨基柱，这个图是阿拉伯糖，流动相用的是乙腈和水70：30，木糖的标准液也是有分叉峰，需要在流动相中加东西吗？

关于液相
阿拉伯糖.png
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1楼 2014-09-19 10:32:05
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南海猪

金虫 (著名写手)

The only one

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这不很明显~~重新筛选流动相及配比~~~文献上的条件并不一定适合你们家的色谱仪~~~
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出来混，不是你帮我就是我帮你~~~
2楼2014-09-19 13:24:39
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薄荷酥

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 南海猪 at 2014-09-19 13:24:39
这不很明显~~重新筛选流动相及配比~~~文献上的条件并不一定适合你们家的色谱仪~~~

不是在流动相里加三乙醇胺什么的就可以抑制分叉了吗？还得重新筛选流动相？
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3楼2014-09-21 12:51:29
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smart_phenol

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可不可能你的糖不只是一种，里面有同分异构体呢？前面的大峰峰形很好，说明柱子没问题；但目标峰分成很明显的两个，有可能是两种物质。建议用其他糖的标品试试。
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come on with wonderful life.
4楼2014-09-22 09:14:50
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薄荷酥

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by smart_phenol at 2014-09-22 09:14:50
可不可能你的糖不只是一种，里面有同分异构体呢？前面的大峰峰形很好，说明柱子没问题；但目标峰分成很明显的两个，有可能是两种物质。建议用其他糖的标品试试。

试了三种糖，阿拉伯糖和木糖都分叉，只有葡萄糖不分叉，不知道到底是怎么回事了
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5楼2014-10-09 17:12:53
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lily19861202

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主，阿拉伯糖我做过，也是用的氨基柱，正常情况下是不会出现这种问题的。
可以做以下几个工作：
1、不知道你过柱子的是含有一定杂质的样品还是标准品。如果是样品，这种情况很有可能是样品中有其他干扰物质，在这种液相条件下，分离效果不好。如果是标准品，一定要确定标准品没有污染、过期变质，标准品要有保证才能进行下一步的实验。
2、如果是液相条件不合适，可以看参考文献，尝试其他的流动相，或者通过调整流动相比例、流速，促进不同物质的分离。
3、柱子不适用，或者柱子使用的时间长了柱效降低，建议换一根柱子。还有专门做糖的糖柱，楼主如果有的话可以试试，但是价格很高。
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6楼2014-10-10 09:30:52
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薄荷酥

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lily19861202 at 2014-10-10 09:30:52
楼主，阿拉伯糖我做过，也是用的氨基柱，正常情况下是不会出现这种问题的。
可以做以下几个工作：
1、不知道你过柱子的是含有一定杂质的样品还是标准品。如果是样品，这种情况很有可能是样品中有其他干扰物质，在 ...

你好，我想问一下你做阿拉伯糖的时候流动相用的是什么，我做的是标准品，按理说不应该出现这种情况的，是不是在流动相里加点三乙醇胺就会好了？
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7楼2014-10-10 10:31:08
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lily19861202

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 薄荷酥 at 2014-10-10 10:31:08
你好，我想问一下你做阿拉伯糖的时候流动相用的是什么，我做的是标准品，按理说不应该出现这种情况的，是不是在流动相里加点三乙醇胺就会好了？...

我用的流动相也是乙腈水，做标准品正常情况下不会出现分叉的情况。楼主用的肯定是示差折光检测器吧？我觉得有几个情况需要注意一下：
1、再次确定标准品没有变质。
2、有可能你进的对照品浓度太大，柱子过载了，可以尝试降低浓度看看，因为我之前做的液相峰高也就是150，峰面积220万，峰形还算不错，我看你的峰高挺高的，也有可能是液相型号不同造成的。
3、柱子有问题，我用的资生堂的氨基柱，效果还是不错的，你可以更换其他品牌的柱子试试，确定不是柱子的问题。
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8楼2014-10-11 09:55:18
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