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厌氧瓶小试培养厌氧甲烷氧化菌的问题，欢迎各位指导讨论！ 已有2人参与
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楼主今年硕三，正在做培养厌氧甲烷氧化脱氮的实验。 具体为：2L的玻璃反应器，接种污泥500ml，添加蒸馏水，液相体积1.6L，气相体积0.4L。由于反应消耗甲烷，曝气90%的甲烷，保证严格的厌氧状态。添加的电子受体是NO2-，现在已经培养半年，通过测试NO2-的还原速率以及CH4的消耗速率，根据化学计量学及国外文献报道，已经达到与报道相当的速率。也就是说菌种已经培养出来了。 现在，导师要求把正在培养的污泥转移到厌氧瓶中做小试的批实验，楼主还没做过厌氧瓶的实验，但感觉和中试2L的差不多。有几个问题向各位咨询请教。 1、厌氧瓶我想用25ml或者50ml的，那么气液体积比是否应该和我做2L的一样？ 2、我做的2L反应器需要定时曝气甲烷（每周一次），每天监测液相NO2-的浓度和气相CH4浓度变化，也就是每天要取液相和气相，还要添加NO2-。如何做到？由于厌氧瓶体积小，取样对其压力影响较大，怎么尽可能的减少体积的变化？ 3、如何保证整个实验过程的厌氧状态？主要是取样和进样过程。 4、我现在的2L反应器用的是磁力搅拌，改为厌氧瓶小试后，改用摇床。只要保证泥水混合均匀，应该没有影响吧？ 谢谢各位指出意见，楼主将不吝散金币！ |
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9楼2014-12-12 11:38:31
RuyangHan
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【答案】应助回帖
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1、厌氧瓶我想用25ml或者50ml的，那么气液体积比是否应该和我做2L的一样？ 气液相的体积比不太重要吧，关键还是气液接触面积和甲烷的可获得性。要是担心的话，就设成和2L是一致好了。 2、我做的2L反应器需要定时曝气甲烷（每周一次），每天监测液相NO2-的浓度和气相CH4浓度变化，也就是每天要取液相和气相，还要添加NO2-。如何做到？由于厌氧瓶体积小，取样对其压力影响较大，怎么尽可能的减少体积的变化？ 液相气相的体积和你每天的采样量是已知的，所以你测定到CH4 浓度后可更加体积改变做计算修正出CH4利用量。体积改变对后期生长的影响是没法改变的。 3、如何保证整个实验过程的厌氧状态？主要是取样和进样过程。 不知道你做2L是怎么采样，应该是一样的啊。你用厌氧瓶，肯定有厌氧瓶塞。采样时先将注射器在氮气中反复换气，就可用来采样了。 4、我现在的2L反应器用的是磁力搅拌，改为厌氧瓶小试后，改用摇床。只要保证泥水混合均匀，应该没有影响吧？ 用摇床应该没问题的。 |
2楼2014-09-17 05:45:24
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谢谢您的应答，关于你的回复，我还有些话要说： 1、厌氧瓶我想用25ml或者50ml的，那么气液体积比是否应该和我做2L的一样？ 气液相的体积比不太重要吧，关键还是气液接触面积和甲烷的可获得性。要是担心的话，就设成和2L是一致好了。 由于这项研究目前国内少有人做，而气液比在文献中基本都是一样的，所以我还是想按照2L反应器的气液比进行；气液接触面当然越大越好，我会选择“矮胖”的厌氧瓶的；由于我在气相中充的是甲烷，所以不存在甲烷的可获得性问题；因为我是做小试实验，种泥一共就2L，而且要做各种因素分析，2L不现实。不然我就直接在原反应器上做了。 2、我做的2L反应器需要定时曝气甲烷（每周一次），每天监测液相NO2-的浓度和气相CH4浓度变化，也就是每天要取液相和气相，还要添加NO2-。如何做到？由于厌氧瓶体积小，取样对其压力影响较大，怎么尽可能的减少体积的变化？ 液相气相的体积和你每天的采样量是已知的，所以你测定到CH4 浓度后可更加体积改变做计算修正出CH4利用量。体积改变对后期生长的影响是没法改变的。 这个可行，就是体积的换算，主要是影响气相体积的确定。 3、如何保证整个实验过程的厌氧状态？主要是取样和进样过程。 不知道你做2L是怎么采样，应该是一样的啊。你用厌氧瓶，肯定有厌氧瓶塞。采样时先将注射器在氮气中反复换气，就可用来采样了。 2L的反应器比较复杂，反应器上有很多开孔，包括气液相的取样孔，而厌氧瓶我没有用过，想在小小反应瓶上开几个孔也不现实。我觉得最多开两个孔吧，一个进气、一个出气。但是我在2L反应器里取气相用的是精密型可密封的注射器，是在耐扎密封垫上直接穿刺取样。所以你的建议也不太可行。 4、我现在的2L反应器用的是磁力搅拌，改为厌氧瓶小试后，改用摇床。只要保证泥水混合均匀，应该没有影响吧？ 用摇床应该没问题的。 这个应该是可行的。 再次感谢你的应助。还请继续解答的我的问题！ |
3楼2014-09-17 10:09:02
RuyangHan
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4楼2014-09-17 10:29:59
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RuyangHan
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6楼2014-09-18 09:16:19
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叶夏媛
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8楼2014-12-11 20:52:37
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10楼2014-12-14 09:27:57
50