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细菌素过SPE C18柱后活性消失,找不到原因
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过SPE C18柱前,细菌素有活性。过柱之后,活性消失。 我刚开始以为是不是活化未完全,导致细菌素没法上柱,但我测定了上样时的流出液,证明没有抑菌活性,这是不是表明柱子活化完全并且细菌素已经上样成功了呢? 然后我用10%~100%乙腈洗脱,测定后发现不同浓度洗脱液都没有抑菌活性。 我将洗脱液换成了异丙醇,洗脱液同样没有抑菌活性。 我用5ml甲醇和5ml超纯水活化的,洗脱液各浓度4ml,用的是waters公司的Sep-Pak的C18柱,500mg/6cc。 请教大家了~谢谢! |
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