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李小香

银虫 (小有名气)

[交流] 求助:液相色谱柱长短的影响

我现在分析一个氨基化合物,客户用300mm的柱子,我用的是150mm柱,其他条件一样,我得到的谱图,主峰后面像是有一个小峰没有分开,无论怎么调节流动相比例,都没法分开,请问这是不是因为柱子长短引起的啊?谢谢了
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李小香

银虫 (小有名气)

流速本来就是0.8ml/min,不过我还是调低一点试了试,发现没用,将乙睛比例增大至30%时,峰形正常,我现在怀疑会不会不是两个物质啊?
8楼2008-04-24 10:10:42
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫

★ ★
dnp(金币+2,VIP+0):谢谢,请继续关注下吧……^_^
引用回帖:
Originally posted by 李小香 at 2008-4-21 16:48:
我现在分析一个氨基化合物,客户用300mm的柱子,我用的是150mm柱,其他条件一样,我得到的谱图,主峰后面像是有一个小峰没有分开,无论怎么调节流动相比例,都没法分开,请问这是不是因为柱子长短引起的啊?谢谢了

可能是这方面的原因:一般情况下长柱子比短柱子的分离度要好,要使用短柱子在做时要降低有机相比例,可以增加样品得保留值,提高分离度!!
  你应该改变一下流动相(增加水相的比例),做一做,结果应该比你现在的峰型要好看!!
是也罢,非也罢,是是非非争个啥。河东河西三十年,对的错啦,错的对拉!得也罢,失也罢,患得患失误年华。凡事该做尽管做,得了更好,失也没啥!
2楼2008-04-21 16:55:37
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李小香

银虫 (小有名气)

唉,问题是原有条件流动相中有机相比例已经很低了,用的是10%的乙腈,我调到5%还是分不开,换成甲醇作流动相也分不开,没辙了。。。。
3楼2008-04-21 17:11:10
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jjf4085

木虫 (正式写手)


dnp(金币+1,VIP+0):谢谢应助……^_^
按楼主说的,肯定是由柱长引起的了,把有机相的比例调到1%试一下,有时柱子就是对某一比例比较敏感,如果还是分不开只有换柱了!
4楼2008-04-21 18:25:14
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