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爽爽幸福

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚苯乙烯微球连接抗体 出现聚合沉淀 已有3人参与

我在天津倍思乐公司买的羧基的聚苯乙烯微球,想与抗体连接,但是出现了一个很严重的问题,微球一加EDC和NHS就全部聚集在一起,请教各位这是什么原因呀,怎么解决?
具体的步骤是加入了100ul的微球和200ulPH7.4的PBS 之后加入2mg的EDC和2mg的NHS,然后一加EDC就出现沉淀,根本没有办法往下做,谢谢各位了!
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

EDC和NHS怎么可能用pH7.4活化?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-05-26 09:03:42
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本帖内容被屏蔽

3楼2020-11-11 11:14:48
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苏苏要毕业

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是羧基活化成酯后水溶性变差了
4楼2020-11-13 20:41:45
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

先看看EDC/NHS活化的化学式。粒子原来是带电荷的,活化之后就羧基的电荷就少了(或者没了),静电斥力消失,当然容易沉淀。
此外EDC/NHS的量太多了,缓冲液也不对。
5楼2021-08-08 15:23:15
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yan vicky at 2020-11-11 11:14:48
请问您解决问题了吗?我看文献中用的是PH5.0的PBS。还有天津倍思乐的磁性微球质量如何?

看文献不如看看大公司的试验指导,可能更管用
6楼2021-08-08 15:24:35
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